P38MAPK在榄香烯致鼠胶质瘤C6细胞增殖抑制和周期阻滞中的作用

胶质瘤,作为最常见的恶性脑肿瘤,具有高度侵袭性,对药物治疗极不敏感,也很难被完全切除。胶质瘤可以发生在任何年龄,即使经手术及放化疗,平均生存期也很短。多年来,对胶质瘤的治疗研究仍没有大的进展,目前仍以缓解症状为主。榄香烯是从中药莪术中提取的由β-,γ-和δ-榄香烯组成的复合物,其中β-榄香烯是主要成分。榄香烯具有抗肿瘤作用,已在脑肿瘤、肝癌、乳腺癌、白血病等多种肿瘤中被证实。近来有报道榄香烯具有抗胶质瘤细胞系增殖的作用,但其具体机制仍不明了。细胞对胞外刺激的反应受多个胞内信号通路的调节。MAPK信号通路既是其中重要的部分,已被证实在胶质瘤的发生中调节细胞的增殖、分散和转移。P38 MAPK和JNK信号通路是其中调节细胞增殖、分化和凋亡的重要通路。大量证据表明p38 MAPK介入细胞生长和细胞周期调控。在酵母和哺乳动物中都发现p38 MAPK参与细胞生长的调控。 在本研究中,主要探讨榄香烯对神经胶质瘤细胞体外增殖和细胞周期的影响的相关机制及其对神经胶质瘤细胞体内增殖的的影响。通过采用细胞计数、流式细胞分析、Western blot等方法分别检测不同药物浓度和不同作用时间榄香烯对胶质瘤细胞的增殖影响和香烯对胶质瘤细胞的细胞周期的影响以及p38、JNK蛋白质表达的变化,并观察p38抑制剂和其显性失活突变体对榄香烯作用的影响,同时还观察榄香烯对接种C6胶质瘤细胞的裸鼠的肿瘤生长情况的影响。结果发现榄香烯对大鼠C6胶质瘤细胞具有明显的体外增殖抑制作用,榄香烯对C6胶质瘤细胞的增殖抑制效应呈剂量、时间依赖性,随药物浓度和作用时间的增加,抑制效应增强,而且榄香烯可以诱导大鼠C6胶质瘤细胞G0/G1期的阻滞。榄香烯明显上调磷酸化p38蛋白表达,同样具有剂量、时间依赖性,而对JNK蛋白表达无明显影响。通过使用p38的特异性抑制剂吡啶咪唑类衍生物(SB203580),为研究p38在榄香烯抗大鼠C6胶质瘤细胞体外增殖中的作用提供了有力工具。抑制p38的激活,可以阻断榄香烯的作用。不仅如此,榄香烯能明显抑制接种C6胶质瘤细胞的裸鼠的肿瘤生长,可见榄香烯同样可以抑制C6胶质瘤细胞的体内增殖。本研究证实榄香烯能抑制胶质瘤细胞的体内和体外增殖,诱导胶质瘤细胞的G0/G1期的阻滞,上调磷酸化p38蛋白质表达可能是榄香烯抑制C6胶质瘤细胞增殖、诱导C6胶质瘤细胞周期阻滞的机制,为榄香烯用于临床治疗胶质瘤提供了新的依据。