电针对骶髓损伤后神经源性膀胱（尿潴留）大鼠NGF-TrkA及PI3-K/AKt通路的影响

目的：通过观察电针次髎、中极、三阴交(穴)对骶髓损伤(Sacral spinal cord injury,SSCI)后神经源性膀胱(Neurogenic bladder,NB)尿潴留(Urinary retention,UR)大鼠膀胱组织HE染色情况、最大膀胱容量、以及膀胱组织NGF、TrKA、PI3-K、Akt含量的影响,探讨电针次髎、中极、三阴交(穴)促进SSCI后UR大鼠膀胱功能修复的可能机制。 方法：SD雌性大鼠40只,随机抽取10只为空白组,其余30只行脊髓横断手术造模后随机分为模型组、电针穴位组和对照点组3组,每组各10只。待大鼠度过脊髓休克期且成模后,即在术后第15天开始按组分别施以7次不同治疗。且所有大鼠在术后第14天和治疗7次后行膀胱最大容量检测,7次治疗结束后处死大鼠,取用膀胱组织,一部分膀胱组织行HE染色进行大鼠膀胱组织形态学观察,另一部分western blot检测大鼠膀胱组织中的NGF、TrKA的表达以及ELISA法检测PI3-k、Akt表达。 结果：1.最大膀胱容量：①各组治疗前后相比较,对照点组和穴位组最大膀胱容量均较前降低、但穴位组降低程度更明显(P<0.01)；②治疗后最大膀胱容量,对照点组及穴位组膀胱容量小于空白组及模型组,治疗前后膀胱容量差值(d值),对照点组及穴位组大于空白组及模型组,均有统计学差异(P<0.05)；但穴位组治疗后膀胱容量较对照点组更小,d值更大,有统计学差异(P<0.05)。 2.HE染色观察膀胱组织形态学：①空白组：膀胱组织正常；②电针穴位组：黏膜上皮组织层次清楚,连续,表层细胞正常。可见少量轻度细胞空泡及中性粒细胞,基层与上皮组织之间偶见异常出血或毛细血管扩张；③电针对照点组：黏膜上皮组织层次紊乱,可见较多空泡细胞及中性粒细胞浸润、血管外异常出血或毛细血管扩张；④模型组：黏膜上皮组织层次紊乱,上皮细胞脱落,膀胱壁变薄,可见大量空泡细胞,黏膜层及肌层可见大量中性粒细胞浸润,并可见大量血管外异常出血或严重毛细血管扩张。 3.Westernblot法检测膀胱组织内NGF含量：模型组、穴位组膀胱组织内NGF含量较空白组明显增高,差异具有显著性意义(P<0.01)；且穴位组NGF含量较对照点组及模型组增高更明显,差异有统计学意义(分别为P<0.05,P<0.01)。 4.Westernblot法检测膀胱组织内TrKA含量：模型组、对照点组、穴位组膀胱组织内TrKA含量较空白组明显增高,差异具有显著性意义(P<0.01)：且穴位组膀胱组织内TrKA含量较模型组及对照点组更高,差异均有显著性意义(P<0.01)。 5.ELISA法检测膀胱组织内P13-K及Akt含量：模型组、对照点组、穴位组膀胱组织P13-K及Akt含量较空白组明显增高,差异具有显著性意义(P<0.01)；且穴位组膀胱组织内P13-K及Akt含量较模型组及对照点组更高,差异均有显著性意义(P<0.01)。 结论：1.脊髓横断法制备SSCI后UR大鼠模型,损伤完全,成模率高。成模的典型表现为大鼠双下肢拖动行走,最大膀胱容量增加,排尿困难,尿潴留。 2.电针“中极”,“次髎”,“三阴交”穴可增强逼尿肌回缩力,减小膀胱容量,减少残尿量,减轻尿潴留症状,有利于恢复膀胱生理功能；可减轻膀胱组织炎症,减轻膀胱组织形态学发生病理性变化的程度。 3.电针“中极”,“次髎”,“三阴交”穴可以通过使NGF及其受体TrKA增殖,并激活下游的PI3K/AKT通路,进而激活相关抗凋亡因子达到抑制膀胱组织细胞凋亡,并促进受损组织细胞修复再生,发挥对受损膀胱组织细胞的保护和修复作用,从而达到修复膀胱功能的目的。