柳茶对四氧嘧啶糖尿病小鼠降糖作用和对高脂血症大鼠游离脂肪酸影响的实验研究

柳茶以蔷薇科鲜卑花属植物鲜卑花Sibiraea laevigata(L.) Maxim.和窄叶鲜卑花S. angustata (Rehd.) Hand-Mazz的叶和枝入药,藏药文献收载主治热病和疫病,可用于消食导滞、疏散风热。分布于我国西部甘肃、四川、青海、西藏等省区。近年来随着对藏药柳茶资源研究的逐渐增多,发现其在调节脂类代谢、抗氧化、促消化、提高免疫力、降肥胖型大鼠血糖等方面都有比较好的作用,且柳茶资源丰富,以叶和枝入药,在可持续发展的同时可以充分利用地方资源。故我们在对甘肃产降糖中草药资源进行文献整理的基础上,开展了柳茶水提物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠降糖作用的实验研究,建立了用气相色谱-质谱联用技术测定血清中游离脂肪酸的方法,研究了柳茶及复方(柳茶、黄芪、玫瑰)提取物对高脂血症大鼠模型血清中游离脂肪酸的影响。 本课题组观察了柳茶水提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖、糖耐量曲线和胰岛状态的影响。按220mg/kg剂量分两次腹腔注射四氧嘧啶制备糖尿病模型,将造模成功的小鼠分为模型对照组、阳性对照组、柳茶水提物高、中、低剂量组(相当于原药材10,7,4g/kg),阳性对照组给予消渴灵片(4片/kg,合1.44g/kg)。空白组给予蒸馏水,正常给药组给予高剂量柳茶,共7组。实验结果表明柳茶水提物中、低剂量治疗组和阳性药治疗组均能显著降低糖尿病模型小鼠血糖,改善其糖耐量异常；高剂量组降糖作用不显著,可延缓糖尿病小鼠的糖耐量曲线；对正常小鼠血糖无明显影响；柳茶高、中剂量治疗组胰腺中胰岛数目相对增多,形态也有所改善,提示柳茶对胰岛损伤有修复作用,其机制可能与促进已损伤胰岛β细胞的修复与再生,增强胰岛的分泌功能有关。 采用气相色谱-质谱联用技术,建立了同时测定血清中壬酸、十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、十七烷酸、亚油酸、油酸、十八烷酸、花生四烯酸、花生五烯酸、二十烷酸共11种脂肪酸的分析方法。方法学验证表明,此方法具有良好的线性关系,精密度和重复性RSD值保持在10%以内,加样回收率在80%-120%之间。用此方法来研究柳茶及复方水提物对高脂血症大鼠游离脂肪酸的影响。除空白组外,将造模成功大鼠分为模型对照组、阳性对照组(多烯酸乙酯,1mL/kg)、柳茶水提物低、高剂量组(6.0,12.0g/kg)、复方水提物低、高剂量组(6.0,12.0g/kg),复方粗多糖提取物低、高剂量组(6.0,12.0g/kg)共9组,腹主动脉采血,分离血清,测定血清中游离脂肪酸含量。结果表明,复方水提物低、高剂量组对高脂血症大鼠血清游离脂肪酸的调节作用强于柳茶水提物低、高剂量组,复方粗多糖低、高剂量组基本无作用。优化出的测定血清中游离脂肪酸的方法,亦可用于其他与游离脂肪酸有关的心血管及代谢性疾病研究,为临床提供方法学支持。