艾灸“肾俞”、“足三里”对RA大鼠血清、滑膜组织中ICAM-1及VEGF的影响

目的：1、比较艾灸、热刺激（香烟）和艾叶提取的艾油分别作用于“肾俞”、“足三里”对类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）模型大鼠产生的效应差异。探究艾灸发挥疗效的主要因素。 2、观察艾灸对类风湿关节炎模型大鼠血清及滑膜中VEGF、ICAM-1水平的影响，探讨艾灸治疗RA的作用机理，为艾灸的温通效应提供更多的实验依据。 方法：将100只雄性Wistar大鼠适应性喂养一周后，按照《卫生统计学》随机数字表随机抽取20只为正常组，其余大鼠以弗氏完全佐剂结合风、寒、湿环境建立RA大鼠模型[1]，随机分为模型组、艾灸组、艾油组、香烟组，每组20只。正常组和模型组大鼠不作任何治疗处理，艾灸组、艾油组、香烟组在模型复制成功后，选取“足三里”和“肾俞”穴，连续治疗15d。艾灸组用特制香烟型纯艾条（Φ=5mm）距穴2cm处悬灸；艾油组用艾叶精油涂抹穴位；香烟组用某品牌香烟（Φ=5mm）距穴2cm处悬灸。疗程结束后，测量各组大鼠患侧足跖容积，并以10%的水合氯醛腹腔注射0.35ml/100g，将大鼠麻醉后活体取材：进行腹主动脉采血，采用酶联免疫吸附法检测血清中VEGF和ICAM-1的含量；取患侧滑膜组织，以免疫组化（SP）法检测VEGF和ICAM-1在滑膜组织中的表达。整个实验过程均按照实验动物伦理学的规定进行。 结果：1、RA模型大鼠足跖与踝部可见明显的急性炎症性红肿，部分可见前肢或对侧肢体甚至耳、尾部红肿或风湿结节，足趾容积较正常组明显增加（P﹤0.01）；经过15天治疗后，艾灸组、香烟组大鼠的足趾容积均小于模型组（P﹤0.01），但与正常组比较仍有差异性（P﹤0.05）；艾油组大鼠的足趾容积和模型组相比无显著性差异（P>0.05）；艾灸组大鼠跖围小于香烟组（P﹤0.05）。2、类风湿关节炎模型组大鼠血清中VEGF、ICAM-1含量较正常组明显增多（P﹤0.01）；艾灸组、香烟组大鼠血清中VEGF、ICAM-1含量较模型组明显降低（P﹤0.01），但与正常组相比，仍有显著差异性（P﹤0.01）；艾油组大鼠血清中VEGF、ICAM-1含量和模型组相比无显著性差异（P>0.05）；艾灸组大鼠血清中VEGF、ICAM-1含量低于香烟组（P﹤0.05）。 3、正常组滑膜组织中也可见少量VEGF表达，模型组滑膜组织中VEGF表达较正常组增多（P﹤0.01）；艾灸组大鼠滑膜组织中VEGF表达较模型组明显减少（P﹤0.01），与正常组相比，仍具有显著性差异（P﹤0.05）；香烟组大鼠滑膜组织中VEGF表达较模型组也明显降低（P﹤0.01），但与正常组相比，仍有极显著性差异（P﹤0.01）；艾油组大鼠滑膜组织中VEGF表达较模型组无明显差异（P>0.05）；艾灸组与香烟组相比，艾灸组大鼠滑膜组织中VEGF的表达较少（P﹤0.05）。 4、正常组滑膜组织中均含有少量ICAM-1；模型组滑膜组织中ICAM-1表达较正常组增多（P﹤0.01）；艾灸组大鼠滑膜组织中ICAM-1表达较模型组明显减少（P﹤0.01），与正常组相比，仍具有显著性差异（P﹤0.05）；香烟组大鼠滑膜组织中ICAM-1表达较模型组也明显降低（P﹤0.01），但与正常组相比，仍有显著差异性（P﹤0.01）；艾油组大鼠滑膜组织中ICAM-1表达较模型组无明显差异（P>0.05）；艾灸组大鼠滑膜组织中ICAM-1的表达较香烟组减少（P﹤0.05）。 结论：1、艾灸“肾俞”、“足三里”穴能显著减轻类风湿关节炎大鼠局部足跖和踝部的肿胀。 2、艾灸可抑制RA大鼠血清及滑膜组织中ICAM-1的水平，减少早期多种炎性因子的释放、浸润及跨内皮移动，从而减轻滑膜炎症，改善局部症状。 3、艾灸可通过降低RA大鼠血清中VEGF的含量，减少VEGF在滑膜组织中的表达，阻抑血管新生，抑制血管翳的形成，从而改善滑膜炎症。 4、在改善局部肿胀、减少VEGF、ICAM-1在血清中及滑膜组织中的水平方面，艾灸、香烟灸效果优于单纯艾油涂抹，提示灸疗所产生的温热刺激是改善类风湿关节炎大鼠局部症状的因素之一，且艾灸能通过抑制VEGF、ICAM-1的水平，改善局部组织粘连、关节肿胀、活动不利等症状，这为艾灸的温通效应提供了部分实验依据。