龙牙楤木总苷对大鼠心肌缺血再灌注相关粘附分子表达的影响

研究背景及目的: 随着社会的发展,冠心病已经成为成年人死亡的重要原因,在经济和工业化发达的国家,它在死亡原因中位居前列。我国的冠心病发病率和死亡率虽然远较这些国家为低,但是在大部分地区,特别是在北方和经济发达地区,都发现冠心病的发病率呈逐年上升趋势。因此防治冠心病成为各国医药学界重要研究课题。 心肌缺血再灌注损伤(Myocardium ischemic reperfusion injury,MIRI)是临床常见的病理现象,是冠心病心肌梗死的病理生理学基础。粘附分子与再灌注损伤有着密切关系,各种粘附分子在心肌细胞的缺血/再灌注损伤作用已经愈来愈受到重视。其中P选择素、CD40/CD40L是近年来研究的热点。 作为世界医药的一个重要组成部分,利用天然植物资源治疗疾病,研制有效的防治冠心病的新药物是目前中医药研究的重要方向。冠心病属中医学“胸痹”、“心痛”范畴。其病机以本虚标实,虚实错杂为主,实则寒凝、气滞、血瘀、痰浊;虚则气血阴阳亏虚,而心气虚则为发病之根本、病机之关键。心气亏虚,无以行血,则血脉瘀滞,气虚血瘀为冠心病最常见病机。本课题针对这一病机,研究具有益气活血功效的龙牙枢木(Aralia elata)对心肌细胞的缺血/再灌注损伤的作用。龙牙楤木其主要有效成分龙牙楤木总苷(aralosides)具有抗炎、抗自由基损伤和抗心肌缺血作用。本研究通过建立心肌缺血再灌注模型,模拟急性心肌IRI,探讨龙牙楤木总苷及普奈洛尔对心肌缺血再灌注过程中粘附分子表达的影响。 方法与结果: 第一部分:观察龙牙楤木总苷对心肌缺血再灌注损伤P选择素表达的影响。方法:龙牙楤木总苷等药物预处理,然后可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注5分钟复制心肌缺血再灌注(MI/R)模型,HE染色观察心肌病理学变化,免疫组化法测量心内膜P选择素的表达。结果表明龙牙楤木组与模型组比较无显著差异。波立维组面密度、积分光密度(IOD)值与模型组比较有统计学显著性差异。 第二部分:观察龙牙楤木总苷对心肌缺血再灌注损伤ICAM-1表达及MDA、GSH-PX的影响。方法:龙牙楤木总苷等药物预处理,然后可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注6h复制MI/R模型,HE染色观察心肌病理学变化,检测血清LDH含量,测定心肌MDA、GSH-PX活性,,ELIsA法测定血清sVCAM-1的表达。结果表明:与模型组比较,龙牙楤木组、波立维组血清LDH含量显著降低(P＜0.05),龙牙楤木组、波立维组SOD活性显著升高(P＜0.05),龙牙楤木组、波立维组与模型组ICAM-1表达没有统计学差异(P＞0.05)。 第三部分:本研究旨在研究龙牙楤木总苷对急性心肌梗死引发的室性心律失常及生存率的改善作用。方法:龙牙楤木总苷等药物预处理,然后冠脉左前降支结扎复制心梗模型,计算心律失常评分、室颤发生率、死亡率、除颤成功率。结果:心律失常评分龙牙楤木组和普萘洛尔组与模型组比较无统计学差异(P＞0.05),合心爽组与模型组比较有显著统计学差异(P＜0.05);室颤发生率龙牙楤木组和普萘洛尔组与模型组比较无统计学差异(P＞0.05),合心爽组与模型组比较有显著统计学差异(P＜0.05);死亡率龙牙楤木组和合心爽组与模型组比较有显著统计学差异(P＜0.05)。除颤成功率龙牙楤木组与模型组比较有显著统计学差异(P＜0.05)。 第四部分:观察普奈洛尔对心肌缺血再灌注损伤CD40L表达的影响。方法:普奈洛尔等药物预处理,然后可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注5分钟复制MI/R模型,HE染色观察心肌病理学变化,免疫组化法半定量测量心内膜CD40L的表达。结果表明普奈洛尔组面密度、积分光密度(IOD)值与模型组比较有统计学显著性差异。 结论: 1、龙牙楤木总苷保护心肌的作用与P选择素、ICAM-1表达无直接关系,其机制可能是通过增加GSH-PX的活力,减少MDA含量,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,减轻心肌细胞的损伤而实现的。龙牙楤木总苷的作用机制有待进一步研究。 2、普奈洛尔可有效地减少缺血再灌注过程中心内膜CD40L的表达,提示普奈洛尔可以改善内皮细胞功能及再灌注微血管功能失调,是其药理作用机制的新发现。 3、龙牙楤木总苷大大降低急性心梗大鼠的死亡率,改善大鼠急性心梗出现的恶性心率失常的预后,提高生存率。其作用机理可能与龙牙楤木抗心肌缺血、稳定心肌细胞电生理及升高室颤阈有关。