陈皮、青皮来源于芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种的果皮,分别于不同的生长期采收。青皮药材因采收期和加工方式的不同分为个青皮与四花青皮两种商品规格；陈皮药材因入药品种的差异分为广陈皮与陈皮两种商品药材,其中来源于变种茶枝柑C. reticulate 'Chachi'的干燥成熟果皮为广陈皮,为陈皮中的道地药材。陈皮、青皮因相同的植物来源在成分、药效等诸多方面存在共性,而不同的采收期所致的次生代谢产物累积变化又使两药各有特性,如两药同属理气药,但在临床应用上陈皮长于理气健脾,青皮长于疏肝破气。《中国药典》2010年版中陈皮及青皮项下均以橙皮苷作为两药的质量控制指标,并未在其质量评价系统中反映出两者在功效上的共性与特性。
本研究以陈皮、青皮为研究对象,以传统中医药理论为指导,围绕阐明其“品种—品质—功效”相关性的科学内涵这一核心目标,对不同采收时间、不同加工方法和不同入药品种的各药材的指标性、代表性成分的定量测定和整体化学图谱的表征进行研究,并结合药效学实验,研究构建同一植物来源的陈皮、青皮品质评价体系。
研究内容及实验结果如下：
1.对陈皮、青皮化学成分进行了比较研究
1.1黄酮类成分
本研究采用HPLC技术,首次建立了同时测定药材中橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、橙皮素、川陈皮素和桔皮素的方法。结果表明,均为果皮类药材的陈皮、四花青皮中含橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素和桔皮素,四花青皮中各成分含量高于陈皮(p<0.01),显示出黄酮类成分的含量随着果实成熟度的增加而降低的规律；以落地幼果入药的个青皮含除以上4种黄酮,还含有柚皮苷和微量的柚皮素、橙皮素,个青皮芸香柚皮苷、橙皮苷、总黄酮含量高于四花青皮和陈皮(p<0.01),川陈皮素和桔皮素含量低于四花青皮和陈皮(p<0.01)来源于变种茶枝柑C. reticulate 'Chachi'的广陈皮所含黄酮类成分与陈皮相同,橙皮苷的含量低于陈皮(p<0.01),其他成分含量与陈皮相当(p>0.05)。聚类结果表明,以橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、桔皮素为指标相较于单独以橙皮苷或者总黄酮为指标能更全面的反映药材的特征。
1.2生物碱类
陈皮及青皮药材中含有以辛弗林为代表的生物碱类成分。青皮药材中辛弗林含量高于陈皮(p<0.01),显示出随果实成熟度的增加而含量降低的趋势；广陈皮辛弗林含量明显低于陈皮(p<0.01)。有学者提出含辛弗林药材的用药安全性问题,如何保证临床用药安全有效,是否应在该类药材品质评价体系中研究制定辛弗林限量规定有待进一步研究。
1.3挥发油
按《中国药典》2010年版一部附录XD挥发油测定法甲法对陈皮、青皮进行了挥发油的提取,并运用GC-MS方法对陈皮、青皮的挥发油成分进行分析。结果表明,陈皮和青皮挥发油主成分均为柠檬烯和芳樟醇,但是不同产地、不同入药品种、不同采收时间和不同加工方式以及挥发油自身的不稳定性导致各药材在挥发油的组成及含量上均有较大差异。
1.4 HPLC指纹图谱
本研究采用HPLC技术,首次对陈皮、青皮甲醇提取物的指纹图谱进行比较研究。直观分析色谱图,陈皮、四花青皮指纹图谱差异较小,无特异性或指标性的峰存在,与标准指纹图谱的相似度均大于0.95；个青皮在峰的个数与峰面积上与果皮类药材差异较大,与标准指纹图谱的相似度在0.8～0.9这一区间；广陈皮与陈皮的指纹图谱与标准指纹图谱相似度在0.97以上。聚类分析表明,品种来源相同的陈皮、四花青皮为一类,采收加工方式不同的个青皮为一类,均来源于茶枝柑C. reticulate'Chachi'的广陈皮与四花青皮为一类。
2.陈皮、青皮对小鼠肠推进和胃排空及对免离体肠肌作用比较研究
陈皮与青皮作为常用理气药,主要用于气滞和气逆等症,表现为脘腹胀满疼痛,恶心呕吐、便秘或腹泻等,均与胃肠运动有关。本研究对陈皮和青皮药材对小鼠胃排空及肠推进作用进行对比研究,实验结果表明,高剂量下,陈皮、青皮均促进正常小鼠胃排空,且陈皮、青皮作用强度相当,但低剂量下并无促进正常小鼠胃排空的趋势；在不同剂量下,陈皮、青皮均能促进正常小鼠的肠推进,且相同剂量下陈皮促进正常小鼠的小肠推进作用强于青皮。
为进一步探索两药在理气作用上的差异部位,以兔离体小肠为研究对象,比较陈皮、青皮的水煎液、挥发油及总黄酮部位的作用差异。结果表明,不同部位对兔离体小肠均呈抑制作用,与临床用药中将陈皮用于胃气壅滞时解痉止痛是一致的；青皮水煎液及总黄酮对兔离体小肠的抑制作用强于陈皮而挥发油弱于陈皮。由各大类成分抑制作用的差异推测两药在功效上的差异是多成分综合作用的结果,而不是单一成分作用的结果。
3.同一植物来源的陈皮、青皮药材的品质评价体系的构建
本研究首次全面、系统的以化学成分差异为切入点对相同植物来源的陈皮、青皮药材进行比较研究。结果提示,陈皮、青皮品质评价体系的构建应着眼于两药在黄酮类成分上的差异,以橙皮苷、芸香柚皮苷、川陈皮素、桔皮素为评价指标能更全面反应药材特征并体现其专属性；如何保证临床用药安全有效,是否应在该类药材品质评价体系中研究制定辛弗林限量规定有待进一步研究；挥发油因其收环境、品种及自身的不稳定性,不建议纳入品质评价体系。同时,在品质评价体系的构建中,建议将个青皮与四花青皮,陈皮与广陈皮单列。
