目的对紫堇科植物岩黄连(Corydalis Saxicola Bunting)进行化学成分提取分离和结构鉴定的研究,对岩黄连总生物碱和分离得到的化合物进行体外活性的初步研究。
方法用95%乙醇对岩黄连全草进行化学成分的提取;采用硅胶柱层析和快速硅胶柱层析方法对化学成分进行分离研究;结合IR、1H-NMR、13C-NMR现代波谱分析,鉴定了分离得到的化合物的结构。使用岩黄连总生物碱和分离得到的化合物进行体外活性的初步研究,应用噻唑蓝比色法(MTT法)测定体外细胞毒活性;应用HE染色方法观察细胞的形态和结构的变化;应用24孔Transwell板对岩黄连总碱进行细胞体外迁移能力的测定;应用MTT法对小鼠脾脏淋巴细胞的免疫力测定;对乙酰氨基酚(APAP)和岩黄连总碱联合使用的毒理研究。
结果从岩黄连的乙醇提取物中共分离得到10个化合物,根据波谱数据分析,鉴定了其中的6个化合物。在体外细胞的毒活性研究中,在岩黄连总碱15.63、31.25、62.5、125、和250μg/ml浓度下,对人鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、卵巢癌A2780、卵巢腺癌SKOV3细胞和PM2细胞株的抑制率呈明显的量效关系,随药物浓度的升高而升高,其IC50分别为112.41μg/ml、123.46μg/ml、148.40μg/ml、128.51μg/ml和166.66μg/ml。在细胞的形态和结构的研究中,岩黄连总碱处理组细胞形态发生明显变化,失去典型的铺展样细胞生长形态,细胞形态趋于一致,细胞核明显变小,细胞数量明显减少,胞体变圆、收缩。在岩黄连总碱与对乙酰氨基酚联合使用的研究中,发现岩黄连总碱会加剧了APAP对肝脏的损害,提示岩黄连总碱不应在APAP之前服用。在对小鼠脾脏淋巴细胞免疫力的研究中,岩黄连总碱对小鼠脾脏淋巴细胞没有抑制作用。