目的:文献META分析以明确三子养亲汤在哮喘治疗中的疗效;星点效应面法筛选三子养亲汤最佳水煎剂工艺;基于哮喘气道炎症关键介质CysLts探讨三子养亲汤抑制OVA致大鼠哮喘气道黏液高分泌的作用机制。方法:1.检索国内外生物医学期刊（1995-2017）,纳入治疗组单独使用三子养亲汤或三子养亲汤联合西药治疗哮喘的随机对照研究进行META分析。2.采用星点-效应面设计,以成都中医药大学附属医院中药房所提供三子养亲汤小包装饮片为原材料,选择溶剂倍数、煎煮时间为自变量,芥子碱有效浓度为评价指标,拟合二次项方程,绘制三维效应面图,选取三子养亲汤最佳提取工艺。3.将60只雄性SD大鼠随机分为三子养亲汤高、中、低剂量组,孟鲁司特组,哮喘模型组,空白对照组,每组10只大鼠。空白组不使用致敏剂,余下五组使用OVA+Al（OH）3致敏并用OVA连续雾化造成哮喘气道黏液高分泌模型。每组于每日雾化前半小时给予相应药物治疗,每只大鼠于每天早晚8点采用尾静脉取血法抽取标本,观测IgE、LTC4的动态变化。至用药后第14天处死动物,取得各组大鼠支气管肺泡灌洗液（Broncho alveolar fluid,BALF）、肺组织及血清标本,采用HE及PAS染色法观察肺内炎症、黏液情况;酶联免疫法（ELISA法）肺泡灌洗液及血清中炎症因子TNF-α、IgE、LTC4、MMP-9的水平;RT-PCR法检测肺组织中MUC5AC mRNA的表达;Western-blot法检测肺组织中MUC5AC、CysLTsR1、P38MAPK、P-P38MAPK的含量。结果:1.META分析结果Z=5.36（P<0.0001）差异有统计学意义,干预措施为阳性结果。2.三子养亲汤的最佳水溶剂提取工艺为:每次加入水溶剂倍数为10倍,提取2次,每次1.2h。3.动物一般情况:空白组大鼠形体壮硕,反应灵敏,皮毛光滑柔顺,摄食饮水良好,体重明显增加。哮喘模型组大鼠第7天开始活动减少,第14天开始,呼吸急促,动作迟缓,弓背蜷缩,皮毛稀疏无光泽,进食饮水成下降趋势,体重增加非常缓慢。三子养亲汤高、中、低剂量组及孟鲁司特组大鼠,精神状态较好、活动频率较哮喘模型组有所增加,进食饮水接近空白组,体重增加较快。4.病理形态学:HE染色:空白组:肺组织结构正常,形态规整,未见明显炎性细胞浸润。哮喘模型组:炎性细胞浸润明显,以嗜酸性粒细胞增多最为显著,并可见基底膜增厚,并伴杯状细胞增生。各给药组:肺组织炎症状态有不同程度的改善。PAS染色:模型组气道上皮中有大量杯状细胞增生,分泌旺盛,可见大量黏液分泌及黏液栓形成。空白组可见少许杯状细胞,黏液分泌很少。各治疗组与哮喘模型组相比黏液分泌均有不同程度的减轻,效果以三子养亲汤高剂量组最为显著。5.TNF-α、MMP-9:与空白组比较,模型组大鼠血清中TNF-α含量升高（P<0.05）。与模型组比较,孟鲁司特组和三子养亲汤三个治疗组均降低（P<0.05）;与孟鲁司特组比较,三子养亲汤各剂量组无明显差异（P>0.05）;MMP-9在各组中的含量变化与TNF-α所得结果一致。6.IgE、LTC4动态观测:IgE:与空白组比较,激发后各时间点的模型组大鼠血清中IgE含量升高（P<0.05）。与模型组比较,起始治疗开始后各时间点的四个治疗组大鼠血清IgE含量有不同程度下降（P<0.05）;与孟鲁司特组比较,三子养亲汤各剂量组无明显差异（P>0.05）;LTC4:与空白组比较,激发后各时间点模型组大鼠血清中LTC4含量升高（P<0.05）。与模型组比较,起始治疗开始后各时间点四个治疗组大鼠血清中LTC4含量均降低（P<0.05）;与孟鲁司特组比较,三子养亲汤高、中剂量组无明显差异（P>0.05）,低剂量组有明显差异（P<0.05）。7.MUC5AC、CysLTs受体1、P38MAPK、P-P38MAPK的表达:空白组比较,模型组大鼠肺组织中MUC5AC、CysLTS受体1、P38MAPK、P-P38MAPK含量均升高（P<0.01）;与模型组大鼠比较,孟鲁司特组及三子养亲汤各剂量组大鼠肺组织中MUC5AC、CysLTS受体1、P38MAPK、P-P38MAPK含量均降低（P<0.05）,以孟鲁司特组及三子养亲汤高剂量组中CysLTs受体1降低尤为明显（P<0.01）;8.MUC5AC mRNA的表达:空白组比较,模型组大鼠肺组织中MUC5ACmRNA含量升高（P<0.05）;与模型组大鼠比较,孟鲁司特组及三子养亲汤各剂量组大鼠肺组织中MUC5ACmRNA含量均降低（P<0.05）,以三子养亲汤高剂量组MUC5AC mRNA降低尤为明显（P<0.01）。结论:1.依据现有文献,三子养亲汤联合西药治疗哮喘较单纯西医治疗有优势。2.三子养亲汤最佳的水提工艺参数为:每次水溶剂倍数为10倍,提取2次,每次1.2h。3.采用OVA致敏雾化法制备哮喘气道黏液高分泌大鼠模型是可行的、成功的。4.三子养亲汤能够抑制OVA所致大鼠哮喘气道黏液高分泌模型的肺内炎症状态和黏蛋白MUC5AC形成。5.三子养亲汤能够降低大鼠哮喘气道黏液高分泌模型血清中炎症因子TNF-α、Ig-E、LTC4的含量,抑制哮喘气道黏液高分泌大鼠肺组织中CysLts受体1及P38MAPK蛋白的磷酸化,从而抑制黏蛋白MUC5AC的产生,三子养亲汤能够发挥较好的祛痰平喘作用与其调控CysLTs信号通路有关。
