红花化学成分及生物活性研究

红花为菊科植物红花（Carthamus tinctorius L.）的干燥花,主产于新疆、河南、浙江和四川等省。红花用于治疗痛经、跌打损伤、冠心病、心绞痛和高血压等疾病。现代药理学实验证明红花具有广泛的药理活性,尤其是心脑血管方面的活性。目前红花中的主要成分羟基红花黄色素A已处于临床试验阶段,由于其结构中含有特殊的醌式查尔酮的结构骨架,使此类成分逐渐成为研究的重点。本论文的主要目的是在系统研究红花化学成分的同时,重点对含有醌式结构的化合物进行研究,以阐明醌式结构的多样性对生物活性的影响。 采用了多种色谱方法（硅胶色谱、ODS色谱、凝胶色谱和HPLC色谱等）和光谱学方法（IR、UV、MS、1D-NMR和2D-NMR）,分离鉴定了46个化合物的结构,其中有8个单体为新化合物。新化合物是:saffloquinoside A（1*）,saffloquinoside B（2*）,saffloquinoside C（3*）,saffloquinoside D（4*）,saffloquinoside E（5*）,safflospermidineA （11*）,safflospermidine B （12*）,2Z-decaene-4,6-diyn-1-O-β-D-glucopyranoside（46*）。已知化合物为:safflomin C（6）,黄色素A（7）,cartormin（8）,羟基红花黄色素A（9）,anhydrosafflor yellow B（10）,N1,N5,N10-（Z）-tri-p-coumaroylspermidine（13）,N1,N5,N10-（E）-tri-p-coumaroylspermidine（14）,6-羟基山奈酚-3,6-二-O-β-D-葡萄糖苷-7-O-β-D-葡萄糖醛酸（15）,6-羟基山奈酚-3-O-β-芸香糖-6-O-β-D-葡萄糖苷（16）,6-羟基山奈酚-3-O-β-芸香糖苷（17）,6-羟基山奈酚-3,6-二-O-β-D-葡萄糖苷（18）,6-羟基山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（19）,山奈酚-3-O-β-槐糖苷（20）,山奈酚-3-O-β-芸香糖苷（21）,山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（22）,山奈酚（23）,芦丁（24）,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（25）,槲皮素（26）,6-羟基芹菜素（27）,芹菜素（28）,新红花苷（29）,safflochalconeside（30）,尿苷（31）,腺苷（32）,7,8-dimethylpyrazino[2,3-g]quinazolin-2,4-（1H,3H）-dione（33）,腺嘌呤（34）,胸腺嘧啶（35）,尿嘧啶（36）,对羟基桂皮酸（37）,对羟基苯甲酸（38）,丁二酸（39）,4-O-β-D-葡萄糖氧基苯甲酸（40）,脂肪酸（41）,谷甾醇（42）,胡萝卜苷（43）,二氢红花菜豆酸-3-O-β-D-葡萄糖苷（44）,roseoside（45）。在这46个化合物中有10个醌式查尔酮苷类化合物,其中5个为新化合物。新化合物1的醌式结构中含有酮糖和醌环以五元螺环稠合的骨架,新化合物2和4的醌式结构中含有以环己烯三酮的形式存在的骨架,它们丰富了醌式查尔酮苷类化合物的骨架类型。另外总结了醌式查尔酮苷类化合物的A环片段（醌环片段）的种类和核磁共振波谱特征。 粗提物生物活性筛选:对醇提取物萃取得到的石油醚层、乙酸乙酯层、水层和水提物进行抗凝血酶活性筛选,结果表明醇提物的石油醚层、水层和水提物在抗凝血酶方面有活性;另外水提物经大孔树脂层析的5%、30%和50%醇洗脱部分在体外经保肝活性、抗氧化活性、细胞保护作用和抗血小板聚集活性筛选,结果显示这三部分均无保肝活性、抗氧化活性和细胞保护作用,而在抗血小板聚集方面,5%和30%醇洗脱部分均有一定的效果。 单体化合物生物活性筛选:单体化合物3*、4*、11*、12*、13和14对小鼠腹腔巨噬细胞TNFα分泌的影响,考察其抗炎活性,结果表明这六个化合物均无明显的抗炎活性;单体化合物3*、4*、11*、12*、13和14对肿瘤细胞HCT-8、Bel-7402、BGC-823、A-549和A2780的影响,考察其抗肿瘤活性,结果表明这六个化合物均无明显的抗肿瘤活性;单体化合物1*和9对心血管活性的筛选表明,这两个化合物均无明显的心血管活性;单体化合物1*、2*、3*、4*、7、8、9和10对保肝活性和抗氧化活性的筛选表明,这八个化合物均无明显的保肝活性和抗氧化活性;单体化合物1*、4*、7、8、11*和12*对抗病毒活性的筛选表明,这六个化合物无明显的抗病毒活性:单体化合物1*、2*、3*、4*、5*、6、7、8、9和10对细胞保护作用的筛选表明,这些化合物均无明显的细胞保护作用;单体化合物1*、2*、3*、4*、5*、6、7、8、9、10和30对抗血小板的聚集活性的筛选表明,化合物1*、2*和4*有抗血小板聚集的作用;考察单体化合物1*、2*、3*、4*、7、8、9和10对PAF刺激的多形核白细胞β葡萄糖苷酸酶释放的抑制作用,结果表明,新化合物2和已知化合物8有抗炎活性,抑制率分别达到了54.3%(10-5mol/L)和63.4%(10-5mol/L)。