半夏泻心汤相关活性成分对胃溃疡大鼠Leptin及ET-1的影响

目的:观察瘦素（Leptin）、内皮素-1（ET-1）在胃溃疡发病中的作用,探讨半夏泻心汤相关活性成分不同配伍防治胃溃疡的疗效与机制。 方法:实验用SD大鼠87只随机分为正常组、假手术组及乙酸性胃溃疡组,乙酸性胃溃疡组在胃窦前壁注入20%乙酸0.05ml复制胃溃疡模型,造模后第三天将其随机分为模型组、西药奥美拉唑组及半夏泻心汤活性成分正交设计组,其中对半夏泻心汤中5种相关活性成分甘草次酸、β-谷甾醇、小檗碱、黄芩苷及人参总皂苷进行L16正交设计分组。每天给药2次,共14天,给药结束后第三天开始取材。肉眼观察实验各组大鼠胃溃疡病灶,用游标卡尺测定溃疡面积,HE染色观察胃粘膜组织病理学变化。采用放射免疫法测定实验各组大鼠动脉血中Leptin、ET-1的含量。采用RT-PCR技术测定实验各组大鼠胃组织中Leptin、ET-1mRNA表达。采用统计学软件SPSS 13.0进行两步分析,第一步对半夏泻心汤活性成分正交设计16组进行方差分析,第二步对正交设计组中第8、12、14、15、16组（即单一活性成分组）以及正常组、假手术组、模型组、西药奥美拉唑组共9组进行统计分析。 结果: 1.胃溃疡病灶肉眼大体形态及病理组织学观察:正常组及假手术组大鼠胃粘膜组织结构层次清楚,无溃疡及充血、水肿;模型组、西药奥美拉唑组及半夏泻心汤活性成分正交设计组可见不同程度的胃粘膜组织缺损,胃溃疡病灶形态不一。 2.溃疡面积测定:正交设计16组中,使用甘草次酸、β-谷甾醇、小檗碱组的溃疡面积均数比不用者小,同时使用β-谷甾醇、小檗碱组的的溃疡面积均数比不用者小,同时使用黄芩苷、人参总皂苷组的的溃疡面积均数比不用者大。实验9组中,正常组、假手术组、西药奥美拉唑组、甘草次酸组、β-谷甾醇组、小檗碱组、黄芩苷组溃疡面积均比模型组小。且差别有统计学意义,p＜0.05。 3.血清Leptin含量放免测定:正交设计16组中,使用甘草次酸、人参总皂苷组的血清瘦素含量均数比不用者高,使用β-谷甾醇组的血清瘦素含量均数比不用者低,同时使用甘草次酸、小檗碱组的血清瘦素含量均数比不用者高。实验9组中,正常组、西药奥美拉唑组、甘草次酸组、人参总皂苷组的血清瘦素含量均比模型组高。且差别有统计学意义,p＜0.05。 4.血浆ET-1含量放免测定:正交设计16组中,使用甘草次酸、小檗碱组的血浆内皮素-1含量均数比不用者低。实验9组中,正常组、西药奥美拉唑组、甘草次酸组、小檗碱组、黄芩苷组血浆内皮素-1含量均比模型组低。且差别有统计学意义,p＜0.05。 5.胃组织Leptin mRNA表达水平测定:正交设计16组中,甘草次酸、β-谷甾醇、小檗碱、黄芩苷、人参总皂苷用与不用组的胃组织Leptin mRNA表达水平无明显差别。实验9组中,正常组、西药奥美拉唑组、甘草次酸组胃组织Leptin mRNA表达水平均比模型组高。且差别有统计学意义,p＜0.05。 6.胃组织ET-1 mRNA表达水平测定:正交设计16组中,使用小檗碱组的胃组织ET-1mRNA表达水平均数比不用者高。实验9组中,正常组、西药奥美拉唑组、甘草次酸组、β-谷甾醇组胃组织ET-1 mRNA表达水平均比模型组低。且差别有统计学意义,p＜0.05。 结论: 1.单独使用甘草次酸、β-谷甾醇、小檗碱、黄芩苷可以缩小胃溃疡大鼠病灶范围,联合应用甘草次酸、β-谷甾醇、小檗碱可使胃溃疡大鼠病灶范围最小。 2.乙酸性胃溃疡大鼠模型可引起血清Leptin含量降低,单独使用甘草次酸、人参总皂苷可提高胃溃疡大鼠血清Leptin含量,联合应用甘草次酸、人参总皂苷、小檗碱可使血清Leptin含量达到最高。 3.乙酸性胃溃疡大鼠模型可引起血浆ET-1含量升高,单独使用甘草次酸、小檗碱、黄芩苷可降低胃溃疡大鼠血浆ET-1含量,联合应用甘草次酸、小檗碱可使血浆ET-1含量达到最低。 4.乙酸性胃溃疡大鼠模型可引起胃组织Leptin mRNA表达水平降低,单独使用甘草次酸可提高胃溃疡大鼠胃组织Leptin mRNA表达水平。 5.乙酸性胃溃疡大鼠模型可引起胃组织ET-1 mRNA表达水平升高,单独使用甘草次酸、β-谷甾醇可降低胃溃疡大鼠胃组织ET-1 mRNA表达水平。 6.胃溃疡发病可能与血清Leptin含量、胃组织Leptin mRNA表达水平降低以及血浆ET-1含量、胃组织ET-1 mRNA表达水平升高有关,半夏泻心汤相关活性成分可能通过升高Leptin水平、降低ET-1水平达到促进胃溃疡愈合的目的。