电针对炎性痛大鼠病灶局部皮肤组织CB2受体蛋白表达的影响

目的:研究不同频率电针对炎性痛大鼠病灶局部皮肤组织中CB2(cannabinoid receptor 2)受体蛋白表达的影响以及对皮肤角质化细胞及浸润的不同类型的免疫细胞中CB2受体表达的影响。 方法:采用健康成年雄性SD大鼠,随机分为6组:正常组、炎症组、2Hz电针组、15Hz电针组、100Hz电针组和假电针组。除空白对照组外其它各组大鼠于左后肢足背皮下注射完全弗式佐剂(Complete Freund’s Adjuvant,CFA)50μl制备皮肤炎性痛模型。用不同频率电针致炎侧“环跳”穴(GB 30)、“阳陵泉”穴(GB 34),采用Western Blot及免疫荧光双标组织化学技术检测大鼠致炎后第7天不同频率电针对炎性痛大鼠病灶局部皮肤组织CB2受体蛋白表达的影响以及对皮肤角质化细胞及浸润的不同类型的免疫细胞上CB2受体表达的影响。同时根据电针镇痛效果与炎性痛病灶局部CB2受体表达的相关性,筛选出与电针镇痛效果相关的CB2受体表达显著上调的细胞。 结果: ①2Hz、100Hz电针组大鼠炎性痛病灶局部皮肤组织内CB2受体的蛋白表达水平与正常组、假电针组比较显著升高(P < 0.05);15Hz电针组和正常组、假电针组比较没有显著差异。其中2Hz电针组CB2受体蛋白表达最强,其灰度值比值显著高于100Hz电针组(P < 0.05)。 ②荧光双标免疫组织化学技术结果: A.炎症组、不同频率电针组和假电针组真皮及皮下组织层较正常组增厚,有大量巨噬细胞浸润。双标细胞主要分布在致炎侧病灶局部皮肤组织真皮层和皮下浅层组织,每组都有巨噬细胞与CB2受体双标细胞。2Hz电针组巨噬细胞-CB2受体双标/巨噬细胞阳性面积百分比和正常组、假电针组比较显著升高(P < 0.05)。 B.炎症组、不同频率电针组和假电针组真皮及皮下组织层较正常组增厚,有大量T淋巴细胞浸润。双标细胞主要分布在致炎侧病灶局部皮肤组织真皮层和皮下浅层组织,每组都有T淋巴细胞与CB2受体双标细胞。2Hz电针组T淋巴细胞-CB2受体双标/ T淋巴细胞和正常组、炎症组比较无显著差异。 C.炎症组、不同频率电针组和假电针组表皮水肿隆起,角质化细胞数量和层数较正常组增多。双标细胞主要分布在致炎侧病灶局部皮肤组织表皮层,每组都有角质化细胞与CB2受体双标细胞。2Hz电针组角质化细胞-CB2受体双标/角质化细胞阳性面积百分比和正常组、炎症组,假电针组比较显著升高(P < 0.05)。 D.比较CB2受体阳性细胞中角质化细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞所占比例的结果表明,在正常组、炎症组、不同频率电针组和假电针组中,CB2受体阳性细胞中角质化细胞所占的阳性面积百分比显著大于巨噬细胞和T淋巴细胞(P < 0.05)。 结论: 2Hz和100Hz电针的镇痛效应可能与其上调炎性痛病灶局部皮肤组织中CB2受体的蛋白表达有相关性,其中电针后皮肤角质化细胞上CB2受体表达上调最为显著,可能是参与电针镇痛的主要细胞。