乌骨鸡磷脂的提取、成分分析及活性研究

乌骨鸡（Gallus gallus domesticus brisson）属于鸟纲、鸡形目、雉科、鸡属，是我国特有的药用保健鸡种，主要产于江西省泰和县武山。作为传统中药，既可单独食用又可配药入复方，具有补肝肾、益气血、退虚热、治心腹痛等功效。乌骨鸡磷脂是乌骨鸡有效成分之一，具有较高的药用和保健价值。本文对乌骨鸡磷脂进行了系统研究，为乌骨鸡及其活性成分的有效利用及综合开发提供了理论基础。主要研究内容与所得结果如下： 1．将抗坏血酸-钼蓝比色法用于测定乌骨鸡肌肉磷脂含量。乌骨鸡肌肉中磷脂含量为：5.11mg／g鲜肉，22.0mg／g干肉，磷脂占油脂的5.23％。 2．通过对不同提取方法进行比较，得出乌骨鸡磷脂最佳提取方法为混合溶剂超声提取法，通过正交试验得出最佳工艺条件为：以HXIP 3∶1为溶剂，固液比1∶7，室温（30℃）超声提取40 min，重复提取2次。在此条件下进行验证试验，磷脂相对提取率达85.29％。 3．采用硅胶固相萃取小柱纯化乌骨鸡磷脂，萃取条件为：上样量为0.8 mL（浓度400 mg／mL），经4 mL氯仿洗脱后，以甲醇8 mL洗脱得磷脂，回收率达95％。结合TLC法进行分析，展开剂：氯仿／甲醇／冰醋酸（6.07∶2.43∶1.5，V／V），展距8cm，显色后，在与磷脂对照品色谱相应的位置上显现4个分离清晰的斑点，分别为LPC、PC、PI、PE。 4．建立了乌骨鸡中四种磷脂含量测定的HPLC分析方法，采用乙腈／甲醇／水（8∶2∶1，V／V）为流动相等度洗脱。乌骨鸡肌肉中各磷脂类组分的色谱峰分离良好，线性关系好，加样回收率令人满意。 5．以GC-MS联用技术对乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸组成进行分析。结果显示，乌骨鸡总磷脂含8种脂肪酸（硬脂酸、花生四烯酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、DHA、二十碳三烯酸、棕榈油酸），其中高比例的PUFAs和AA含量是其脂肪酸组成的显著特征；其中PC、PE含上述全部脂肪酸，LPC中未检出二十碳三烯酸，PI中未检出棕榈酸和二十碳三烯酸，PC、PE、LPC中硬脂酸和花生四烯酸的含量较高，PI中棕榈油酸含量达到41.95％。 6．通过体外实验考察乌骨鸡磷脂对阴虚大鼠ATP酶活性的影响。结果表明一定剂量的乌骨鸡磷脂能显著降低阴虚大鼠Na+，K+-ATP酶和Ca2+，Mg2+-ATP酶活性，提示其有滋阴降火作用。