依达拉奉对大鼠小肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的通过大鼠小肠缺血再灌注(Ischemia-reperfusion I/R)对小肠粘膜的损伤程度,促炎因子和抗炎因子的释放方面研究依达拉奉(Edaravone 3-甲基-i-苯基-2-N比啉唑-5-酮)对小肠I/R损伤的保护作用,从而为临床防治小肠I/R损伤提供一个新的治疗思路。 方法SPF级健康成年SD大鼠60只,体重在280g-320g之间,均为雄性,随机分为对照组、I/R组和依达拉奉组3组(n=20),每组根据再灌注时间不同再分为2小时组和4小时组两个亚组(n=10)。于实验前一天禁食,自由饮水,实验前2小时行含绿色荧光蛋白大肠杆菌灌胃。实验中对照组开腹后仅分离肠系膜上动脉(SMA)后关腹;I/R组分离SMA后以无创动脉夹夹闭,45min后松开动脉夹,分别于再灌注2小时、4小时时采集标本;依达拉奉组夹闭SMA45min后行再灌注,于再灌注前5min经大鼠尾静脉按3 mg/kg剂量注入依达拉奉,分别于再灌注2小时、4小时时采集标本。小肠粘膜组织HE染色后病理学检测,对门静脉血、肝脏组织及脾脏组织行细菌学培养,ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的含量。 结果(1)肠粘膜病理变化:对照组大鼠小肠绒毛完整,排列整齐,炎性细胞浸润少,无明显出血及脱落。I/R组大鼠在再灌注2小时和4小时小肠绒毛上皮顶端与固有层分离,固有层出血和溃疡,大量炎性细胞浸润,粘膜绒毛坏死脱落。与I/R组相比,依达拉奉组在再灌注2小时和4小时肠粘膜绒毛损伤减轻,坏死,脱落减少。依达拉奉组病理损伤评分低于I/R组(p＜0.05)。(2)细胞因子变化:I/R组和依达拉奉组再灌注2小时和4小时大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显高于对照组(P＜0.05),I/R组高于依达拉奉组(p＜0.05),I/R组和依达拉奉组再灌注2小时和4小时时大鼠血清中抗炎因子IL-10含量明显高于对照组(p＜0.05),依达拉奉组高于I/R组(p＜0.05)。(3)细菌移位情况:I/R组、依达拉奉组再灌注2小时、4小时后大鼠门静脉、肝脏、脾脏的细菌移位明显高于正常对照组(p＜0.05),I/R组高于依达拉奉组(p＜0.05)。 结论依达拉奉对大鼠小肠I/R具有保护作用。(1)依达拉奉能有效减轻大鼠小肠I/R损伤小肠粘膜绒毛的坏死程度,减少绒毛脱落,保护大鼠小肠粘膜结构的完整性和正常生理功能。(2)依达拉奉能明显减少大鼠小肠I/R损伤促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量和促进抗炎细胞因子IL-10的释放。(3)依达拉奉可明显降低大鼠小肠I/R损伤后肠道细菌移位。