白介素17对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞表面RANKL、OPGmRNA表达影响的实验研究

目的:探讨白介素17(Interleukin-17,IL17)对类风湿关节炎病人外周血淋巴细胞表面(Lymphatic cell)核因子—kB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor–kB ligand, RANKL )、骨骼保护因子(osteoprotegerin ,OPG)mRNA表达的影响;阐述IL17是否通过上调淋巴细胞表面RANKL因子的表达来增加破骨细胞数量和活性,从而引起类风湿关节炎病人的骨质破坏。方法:取类风湿关节炎病人的外周血分离培养其淋巴细胞,并用免疫组化的方法对其进行鉴定,用不同浓度的IL17(10-9 ug/ml、10-8 ug/ml、10-7 ug/ml、10-6ug/ml、10-5ug/ml)分别处理分离培养的淋巴细胞,24小时后使用Trizol抽提总的RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来观察不同浓度IL17对类风湿关节炎病人外周血淋巴细胞表面RANKL、OPG mRNA表达的影响及RANKL/OPG的比率变化,并将10-6ug/ml浓度组设定时间(0、4、16、24、48小时),在不同的时间分别抽提总的RNA用上述同样的方法测定不同时间IL17对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞表面RANKL、OPGmRNA表达量的影响及RANKL/OPG的比值变化。结果:10-9—10-5ug/ml IL17在24小时后可上调类风湿关节炎病人淋巴细胞表面RANKL mRNA的表达并呈剂量依赖型,但抑制OPG mRNA的表达,且RANKL/OPG比率呈上升趋势(P<0.05)。随着白介素17(浓度10-6ug/ml)作用时间的延长,淋巴细胞表面RANKL mRNA的上调作用、OPG mRNA的抑制作用逐渐增强,RANKL/OPG比率呈明显上升趋势.不同时间段白介素17对RANKL、OPG mRNA表达量的变化,RANKL/OPG比率变化与正常对照组相比有显著差异(P〈0.01)结论:IL17有可能通过调节类风湿关节炎病人淋巴细胞表面RANKL、OPG mRNA量的表达和RANKL/OPG mRNA比例变化,来间接地调节破骨细胞的分化和活性,引起骨质破坏。