针刺对腹部术后胃肠运动功能紊乱的调整作用及机理研究

目的 本研究采用靳三针组穴中的“足三针”远道取穴防治腹部术后胃肠运动功能紊乱,深入探讨针刺对腹部术后胃肠运动功能紊乱的调整作用和机制。临床研究部分采用传统手法针刺与电针治疗进行对照,旨在丰富针刺调整腹部术后胃肠运动功能紊乱的治疗方式。临床研究严格按照随机对照原则进行,可为针刺调整腹部术后胃肠运动功能紊乱提供有力的循证医学支持。机理研究部分以胃肠起搏细胞ICC为主要切入点,从ICC的数量,超微结构,ENS-ICC-SMC网络结构,Kit-SCF系统的SCF基因表达,血液胃肠激素,胃肠组织的炎症反应等不同层面对针刺调整腹部术后胃肠功能紊乱的机制做了较为全面的探讨,旨在为其临床的推广应用提供科学的理论基础。 方法 文献研究 回顾了近20年来术后胃肠运动功能紊乱的临床研究和实验研究文献,对现代医学关于术后胃肠运动功能紊乱的认识、机理研究和治疗进展,以及中医对其病因病机的认识和治法进行了归纳总结,并采用系统评价的方法对所查及的文献进行分析。临床研究 严格按照诊断标准和纳入、排除标准收集广州中医药大学第一附属医院胃肠外科和肝胆外科患者105例,按随机数字表法随机分为手法针刺组、电针组、空白组,每组35人。手法针刺组与电针组取穴相同,均取靳三针组穴里的“足三针”(足三里、三阴交、太冲)进行治疗。手法针刺组的针刺操作为垂直刺入腧穴后持针候气,拇、食、中三指微用力握持针柄,将辨证与辨针下气结合,补虚泻实,施行徐疾提插补泻。若正气不实不虚则采用导气同精手法徐入徐出导之,并配合呼吸调气,随患者一呼一吸将针插入相应深度,再随患者一呼一吸将针提出浅层,待感觉针下正气充实平和,患者自觉症状改善。每穴每次行针约2分钟,治疗30分钟后出针。电针组的针刺操作为足三里和太冲针刺后接一对电极,足三里负极,太冲正极,双三阴交只针刺不加电针。连续疏波,脉冲频率2Hz,电流1～2mA,以患者耐受为度,治疗30分钟后出针。两组均每日2次,直至患者出现排气,最长治疗5天,5天仍未排气者终止治疗。空白组不予针刺。观察并记录术后第一次肛门排气时间,第一次肛门排便时间,恢复流质饮食时间,肠鸣音出现时间及恢复正常时间,腹胀痛分级,胃肠反应分级,对观察结果进行统计分析。实验研究 制作大鼠结肠肠肠吻合模型。设针刺组、模型组、假手术组(开腹操作)、空白组进行比较。术后麻醉清醒即予针刺。针刺组、假手术组取穴均为足三针(足三里、三阴交、太冲),用直径0.18mm,长10mm的针直刺入穴位,每5分钟缓慢提插捻转2～3次。模型组、空白组每天同一时间放于自制固定器中15min。每日针刺1次,每次15分钟,连续治疗3天。观察并记录大鼠术后首次排便时间,术后1-3天每天排便粒数、排便重量。术后第四天采用双探头可变角度单光子发射型计算机断层显像仪(SPECT)对大鼠进行核素扫描胃液相排空实验检测,观察大鼠胃半排时间和60min胃排空率的改变。处死采血进行血浆胃动素和血清胃泌素的含量检测。取胃体中部距贲门1／3的胃运动起搏区、盲肠下2cm处结肠(相当吻合口处)组织,分为四部分：一部分制作病理切片观察组织炎症反应情况；一部分制作冰冻切片后,用C-Kit和VAChT免疫荧光双重标记,用激光扫描共聚焦显微镜观测ENS-ICC-SMC网络结构的改变；一部分用于制作电镜标本以观察ICC超微结构的改变；最后一部分用RT-PCR法检测SCF、CALM1的基因表达。 结果 临床研究 1.术后第一次肛门排气情况：手法组与空白组的差异具有显著性(P<0.05),而手法组与电针组、电针组与空白组的差异均无显著性(P>0.05) 2.术后第一次肛门排便情况：术后排便时间手法组与空白组、手法组与电针组的差异均具有显著性(P<0.05)。就首次排便质量(是否成形)看,手法组与电针组比较P<0.0125。 3.恢复流质饮食时间：手法组与空白组、电针组与空白组均有显著差异,手法组较电针组的差异更大(P手法<0.01,P电针＜0.05)。 4.肠鸣音情况： ①肠鸣音出现与恢复情况：肠鸣音从出现到恢复所需的时间,手法组与电针组、电针组与空白组间有显著性差异(P<0.05),手法组与空白组无明显差异(P>0.05)。 ②肠鸣音评分：电针组与空白组评分差值两组差异显著(P<0.01),手法组与空白组评分差值两组差异显著(P<0.01)。 5.腹胀痛评分：电针组的治疗前后评分差值与空白组相比有显著差异(P<0.05)。 6.胃肠反应评分：电针组治疗前后胃肠反应评分差值与空白组比较,差异有显著性(P<0.05)。 7.疗效评定 ①症状积分评价：手法组治疗前后评分差值与空白组比较有显著性(P<0.05),电针组治疗前后症状评分差值与空白组比较具显著性差异(P<0.01)。 ②疗效指数分析：手法组与空白组、电针组与空白组均具有显著性差异(P<0.01)。 ③疗效分级：手法组与空白组在等级程度和总有效率方面的差异具有显著性(P<0.01)。 8.术后首次排气时间与针刺介入时间的相关分析：以排气时间为y,针刺介入时间为x,采用曲线拟合,求得曲线方程为y=x1.4(50.05)。VAChT阳性神经纤维较模型组明显多,维持神经网络样结构,胆碱能神经节之间的连接较为紧密,荧光强度有所增强(P均<0.05),较空白组无显著性差异(P>0.05)。ICC与胆碱能神经纤维间的长突起较模型组增多,相互间的连接结构较为完整,维持网络样结构。 6.胃肠ICC电镜超微结构的改变：模型组ICC细胞核皱缩,异染色质趋边,呈斑块状；突起明显减少或消失,许多末梢突起破裂,失去胞浆内容物；胞浆空泡形成,胞膜泡状化；胞浆内细胞器数量明显减少,结构出现异常：线粒体数量减少,出现肿胀、嵴断裂、溶解、形成空泡、甚至破裂；内质网扩张,粗面内质网脱颗粒；许多中间丝排空；出现大的脂滴和空的膜结合泡；次级溶酶体增多,与融合性脂滴和成簇的糖原颗粒密切相关；基底膜缺乏或不完整。部分细胞胞浆内微细结构辨认不清。针刺组ICC细胞核保持正常形态,细胞突起损伤不明显,异染色质部分趋边；存在大量线粒体、核糖体、内质网和高尔基体；胞浆内细胞器形态结构较为清楚,少量线粒体肿胀、内质网扩张；基底膜维持完整。 7.胃肠组织SCF基因表达的改变：模型组与空白组存在显著性差异(P<0.01)。针刺组与模型组比较差异存在显著性(P<0.05)。针刺组与空白组无显著性差异。 8.胃动素与胃肠排空的关系：胃动素与胃半排时间的方程为y=165.179-0.732x(0<x≤162),决定系数R2=0.309,P<0.001。胃动素与胃排空率的方程为y=0.008+0.003x(0<x≤162),决定系数R2=0.234,P<0.001。胃动素与排便粒数的曲线方程为y=-0.793x+0.017x2-7.734×10-5x3(0<x≤162),决定系数R2=0.65,P<0.001。 结论 1.针刺能缩短腹部术后首次排气时间,改善术后排便,促使患者提前恢复流质饮食,减轻腹胀痛、恶心呕吐等胃肠反应。 2.手法针刺和电针各有优势。手法针刺在整体调节首次排气排便时间、改善排便质量、促使患者提前恢复流质饮食方面疗效较好,而电针在改善和促进肠鸣音恢复、减轻腹胀和胃肠反应方面疗效较好。不同的优势特点可能与其作用机理有关。手法针刺善于整体调节,而电针则长于改善胃肠电节律,提高阈值。 3.术后首次排气时间与针刺介入时间呈幂相关。 4.针刺对腹部术后胃肠运动功能紊乱的调整作用主要在于促进胃肠蠕动和排空功能的恢复,此功效可能是通过调节血浆胃动素的含量,减轻术后炎症反应,改善胃肠起搏细胞ICC的数量、结构和功能等多方面机制共同作用的结果。 4.针刺能促进腹部术后ICC细胞的再生,ENS-ICC-SMC网络结构的恢复,改善ICC超微结构,这可能与针刺具有调整Kit-SCF系统中SCF基因表达的作用有关。