柑橘果皮醇提取物不同极性部位抗氧化、抗炎活性研究

柑橘类水果是世界第一大类水果,中国作为柑橘属植物的起源地之一,具有丰富的柑橘资源。柑橘果皮中富含类黄酮、酚酸等次生代谢产物,其具有的抗氧化、抗炎活性,对于人类重大慢性疾病的防治具有重要意义。研究柑橘果皮类黄酮提取物的抗氧化、抗炎活性,对于提高中国丰富柑橘资源的利用,推动柑橘产业的发展具有重要的理论意义和实践价值。本研究选取了7个类黄酮含量较高的柑橘基因型,如下：武隆酸橘、聂都野橘、藜檬、台湾椪柑、广西沙田柚、鹅蛋红橘和清见桔橙。以柑橘果皮为研究对象,利用分步萃取法获得了果皮醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相4个极性分段部位。使用HPLC法检测了柑橘果皮乙醇粗提取物不同极性部位的类黄酮成分及含量。使用DPPH、ABTS和ORAC自由基清除实验法研究了柑橘果皮乙醇提取物不同极性部位的体外抗氧化活性,用NO法和酶联免疫法研究了柑橘果皮乙醇提取物不同极性部位的抗炎活性。主要研究结果如下：1.7个基因型的柑橘果皮醇提取物经过不同极性试剂分步萃取后,基于HPLC的检测发现,类黄酮主要集中在乙酸乙酯部位,其次是正丁醇部位、石油醚部位,水溶性部位只含极少量类黄酮。乙酸乙酯部位的类黄酮含量在7个柑橘基因型中存在差异,从高到低依次是：聂都野橘>武隆酸橘>台湾椪柑>广西沙田柚>清见桔橙>藜檬>鹅蛋红橘。以上乙酸乙酯部位分别占其总类黄酮含量的72.29%、73.29%、67.35%、57.34%、65.38%、53.5%和74.84%。乙酸乙酯部位所含的类黄酮的种类在7个柑橘基因型中也存在差异,其中聂都野橘、武隆酸橘和台湾椪柑乙酸乙酯部位中川陈皮素含量均最高,分别占其乙酸乙酯部位总黄酮含量的44.90%、76.26%和49.02%。2.各基因型柑橘果皮醇提取物不同极性部位的抗氧化能力差异显著。各极性部位中,乙酸乙酯部位抗氧化能力最强,正丁醇次之,石油醚部位和水相部位抗氧化能力较弱。根据抗氧化能力综合评价指数,7个柑橘基因型乙酸乙酯部位抗氧化能力顺序为：聂都野橘>武隆酸橘>台湾椪柑>清见桔橙>广西沙田柚>藜檬>鹅蛋红橘。相关性分析结果表明,柑橘果皮乙醇提取物不同极性部位的抗氧化能力与类黄酮含量呈极显著正相关。3.柑橘果皮醇提取物不同极性部位的抗炎活性能力与类黄酮含量呈正相关。乙酸乙酯部位显示出最强的抑制RAW264.7细胞炎症模型NO分泌的能力,且随浓度增加抑制NO分泌的能力增强。聂都野橘、武隆酸橘和台湾椪柑的乙酸乙酯部位显示出最强的抑制NO分泌能力,用酶联免疫法测定结果显示,这3个部位显著抑制细胞因子TNF-α、 IL-6、IL-10分泌,说明川陈皮素在抗炎活性中扮演着重要角色。