蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病肾硬化大鼠肾脏保护作用的研究

目的:通过建立单侧肾切除加重复阿霉素注射所诱导的阿霉素肾病肾硬化动物模型,探讨蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对阿霉素肾病模型大鼠肾纤维化的保护作用及调节机制,进一步了解蝙蝠蛾拟青霉Cs-4对其他细胞因子及其网络的影响。 方法: （1）将80只SD大鼠行单侧肾切除,术后第7天尾静脉注射阿霉素（ADR）5mg/kg,第30天尾静脉注射ADR3mg/kg。后随机分为四组:①模型对照组（M组）20只:首次尾静脉注射阿霉素后,每天用等量生理盐水灌胃;②贝那普利治疗组（B组）20只:首次尾静脉注射阿霉素后,每天用贝那普利4mg/kg灌胃;③蝙蝠蛾拟青酶Cs-4治疗组（P组）20只:首次尾静脉注射阿霉素后,每天用蝙蝠蛾拟青酶Cs-4 500mg/kg灌胃;④联合治疗组（U组）20只:首次尾静脉注射阿霉素后,每天用蝙蝠蛾拟青酶Cs-4500mg/kg和贝那普利4mg/kg灌胃给药。8周处死大鼠。 （2）8周后观察各组大鼠24小时尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白（TP）、血白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）的水平。 （3）肾组织免疫组化常规肾组织石蜡包埋,切片厚度3um,采用SABC法检测肾层粘连蛋白（LN）、肾组织中纤连蛋白（FN）、胶原蛋白Ⅳ（ColⅣ）、转化生长因子β1（TGF-β1）。应用删除第一抗体法作阴性对照,每张切片同一条件下取20个视野,采用JD801形态学图像分析系统进行分析,计算阳性目标面密度和阳性单位乘积。 （4）应用RT-PCR方法测定肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）、组织性金属蛋白酶抑制物1（TIMP-1）mRNA的表达。 结果: （1）P组、B组、U分别和M组相比,24小时尿蛋白定量、BUN、Scr、甘油三脂（TG）、总胆固醇（Cho）明显降低（p＜0.01）,血总蛋白和血白蛋白明显升高（p＜0.01）,U组和P组相比,BUN、Scr、甘油三脂、总胆固醇明显降低（P＜0.05）,并U组和B组相比,BUN、Scr、甘油三脂、总胆固醇亦明显降低（P＜0.05）; （2）肾组织病理显示,M组系膜区轻度增殖,肾间质广泛纤维化,部分肾小管萎缩,部分代偿性扩张,其内查见较多蛋白管型,间质内少量淋巴细胞浸润,间质内细小动脉硬化。而B组和P组纤维化程度较轻,U组最轻; （3）组织免疫组化可见B组、P组、和U组中LN、FN、ColⅣ、TGF-β1的表达明显低于M组; （4）RT-PCR显示B组、P组、U组TGF-β1mRNA、PAI-1mRNA、TIMP-1mRNA的表达,均较M组降低。 结论: 蝙蝠蛾拟青酶Cs-4能明显减少尿蛋白、降低尿素氮和肌酐,调节肾间质纤维化所致的脂质代谢紊乱,改善低蛋白血症。同时能够减少LN、FN、ColⅣ、FGF-β1的表达,下调肾组织中TGF-β1mRNA、PAI-1mRNA、FIMP-1mRNA的表达,减轻基质增生,延缓肾小球硬化,蝙蝠蛾拟青酶Cs-4和贝那普利联合应用效果更加明显,能有效的延缓肾间质纤维化。