石菖蒲对中枢神经系统的作用及机理研究

石菖蒲作为临床常用中药，广泛应用于癫痫、痰厥、热 病神昏、健忘、中风失语、耳鸣、老年性痴呆等疑难病症， 是为数不多的治疗脑病的良药。本课题主要研究石菖蒲对中 枢神经系统的作用、作用的物质基础以及作用机理，为进一 步开发石菖蒲提供依据。 ●目的 1．提取石菖蒲的不同部位（挥发油、含油水提液、去油 水煎液），进行体外和体内（脑组织）成分的综合分 析，探索石菖蒲对中枢神经系统作用的物质基础，初 步确定其有效部位。 2．通过石菖蒲对士的宁所致惊厥小鼠的影响实验，观察 石菖蒲不同部位对小鼠的惊厥潜伏期、惊厥次数、惊 厥发生率、死亡时间、死亡率等的影响，探索石菖蒲 对中枢神经系统（CNS）的药理作用。 3．通过石菖蒲对谷氨酸钠所致惊厥小鼠的影响实验，观 察石菖蒲不同部位对小鼠的惊厥持续时间、惊厥发生 率等的影响，进一步确定石菖蒲对CNS的作用。 4．通过石菖蒲对大鼠脑电图的影响实验，观察石菖蒲不 同部位对脑电图的振幅、频率的影响，证实石菖蒲对 CNS的直接作用。 5．通过对动物脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化 脂质（LPO）、一氧化氮（NO）、γ-氨基丁酸（GABA）、 谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、甘氨酸（Gly）、丙 氨酸（Ala）、牛磷酸（Tau）等指标的测定，探索石菖 蒲不同部位对CNS作用靶点。 ●方法 1．水蒸气蒸馏法提取石菖蒲挥发油和去油水煎液部位， 回流法提取含油水煎液部位，并采用气相色谱质谱联 用（GC-MS）的方法，分析测定体外和体内（脑组织） 写宫时时申枢神＠皿筑的作用丑机理研玩 成分。 2．采用腹腔注射士的宁（兴奋脊髓）溶液的方法，造成 小鼠惊厥的实验模型，观察石葛蒲不同部位的药效。 3．采用侧脑室注射微量谷氨酸钠（兴奋大脑）溶液的方 法，造成小鼠惊厥的实验模型，进一步观察t1H蒲不 同部位的药效。 4．通过直接针刺电极，单极导联的方法，在生物机能测 定仪卜直接描记大鼠脑电图，考察石葛蒲不同部位的 对脑电图的影响。 5．采用邻苯三酚自氧化法测定SOD、TBA法测定LPO、 硝酸还原酶法测定NO、高效液相色谱柱前衍生法测 定GABA、Gin、ASp、Gly、Ala、Tau等氨基酸类神 经递质，探索石直蒲不同部位对CNS的作用机理。 ＠结果 1 石葛蒲不同部位的化学成分及进入动物脑组织的成 分分析： 1．l石葛蒲不同部位的化学成分分析 GC－MS分析发现，石葛蒲挥发油部位的主要成分为： 顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、富蒲二烯、 悦香素、p－细辛醚、a－细辛醚。水提液部位的主要 成分为：顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、p－ 细辛醚。去油水煎液部位的主要成分为：卜细辛醚（含 量很低）、有一未鉴定峰（特征成分）。 1．Zfi兽蒲不同部位透过大鼠血脑屏障的成分分析： 透过大鼠血脑屏障的成分有一挥发油部位；榄香素、 p－细辛醚、Q－细辛醚；水提液和去油水煎液部位中均 未检出透过大鼠血脑屏障的成分。实验结果证明石蔓 蒲的一些成分如p－细辛醚等对大脑有直接的作用，因 为血脑屏障是血脑间物质交换的限制系统，药物对中 枢神经系统的直接作用，必须通过血脑屏障，而药物 经口服后，一些未被破坏及未与血浆蛋白结合的非离 二 石宫＠对申根神觉皿以的你用及机思研玩 予药物才能透过血脑屏障对CNS产生直接作用。 2 石葛蒲挥发油、水提液能明显延长士的宁所致惊厥小 鼠的惊厥潜伏期，减少惊厥次数，小鼠用药后出现自 发活动减少，有低头、伏卧等行为，表现为中枢镇静 作用；水提液、土油水煎液还能使惊厥小鼠的生存时 问明显延长，且能降低惊厥所致小鼠的死亡率，各组 均个能降低惊厥的发生率，即个能对抗惊厥。 3 石葛蒲挥发油、水提液，去油水煎液均能明显缩短谷 氨酸钠所致小鼠惊厥持续时间，明显降低惊厥的发生 率，表现出中枢镇静和对抗惊厥的作用，本实验结果 提示打拿蒲的挥发油及水溶性部位均存在中枢镇静 作用的有效成分，对兴奋性毒素导致的脑损伤有很好 的保护作用。 4 脑电图实验表明，挥发油及水提液能显著降低大鼠脑