茵陈蒿汤始载于汉代张仲景所著《伤寒论》,由茵陈、栀子和大黄3味药组成,具有清热、利湿、退黄的功效,为中医治疗湿热黄疸的经典名方。现代研究表明,茵陈蒿汤具有明显的保肝利胆、改善肝功能、抗肝纤维化等作用,在肝病治疗领域具有广阔的应用前景。筛选该方保肝利胆的药效部位、研究其配伍机理,对研制开发质量可控、疗效确切、使用方便的创新中药,造福更多的肝病患者具有重要意义。
论文分文献综述和实验研究两大部分。
第一部分,文献综述。引用文献102篇,围绕茵陈蒿汤的化学成分、药理作用、药效部位筛选及活性成分、配伍机理4个方面的研究现状进行了文献综述,在此基础上简要介绍了本课题的研究思路和方案设计。
第二部分,实验研究。包括以下3个部分：
一、茵陈蒿汤药效部位筛选
1、茵陈蒿汤醇提与水提部位对小鼠、大鼠黄疸模型的药效比较
茵陈、栀子、大黄按3：2：1比例混合,75%乙醇回流提取,药渣烘干后加水提取,分别得醇提部位和水提部位；α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导小鼠、大鼠胆汁淤积黄疸模型,分别对醇提部位和水提部位进行药效试验,结果表明,两种动物模型的试验结果基本一致,茵陈蒿汤醇提取部位及其药渣的水提取部位均存在保肝利胆的药效物质,提示此法不能有效分离该方的药效部位。
2、茵陈蒿汤水提液不同极性部位对大鼠黄疸模型的药效比较
改用水提醇沉法进行部位分离,即水煎煮提取得茵陈蒿汤水煎液,用不同浓度乙醇由低到高沉淀处理,分成20%、60%乙醇沉淀物及60%乙醇沉淀的上清液3个部位,采用ANIT诱导的大鼠胆汁淤积黄疸模型对这3个部位及水煎原液进行药效比较,结果表明,水煎液的60%乙醇沉淀的上清液部分显示了明显的药效,其余部位均无明显药效,提示该法可有效分离茵陈蒿汤保肝利胆的药效部位,水煎原液可能因某些成分含量偏高而产生一定肝毒性而部分抵消了药效作用。
二、茵陈蒿汤配伍机理初步研究
将茵陈蒿汤进行拆方组合,分为全方、茵陈+栀子、茵陈+大黄、栀子+大黄、茵陈、栀子、大黄共7种组合,以60%乙醇回流提取得各组合提取物,分别采用ANIT诱导的小鼠、大鼠胆汁淤积黄疸模型,对各组合提取物进行药效比较,结果表明：
1、全方、大黄单用及全方撤茵陈或栀子对小鼠黄疸模型具有明显保肝利胆作用,茵陈单用或全方撤大黄作用不明显,栀子单用具有一定的肝毒性。
2、全方、大黄单用及其与茵陈配伍对大鼠黄疸模型具有明显保肝利胆作用,茵陈、栀子单用及其配伍作用不明显,栀子和大黄配伍作用也不明显。
以上两种模型的试验结果提示：与传统中医理论解释的茵陈蒿汤中茵陈为君药、大黄为佐药不同的是,我们通过实验研究发现,大黄在茵陈蒿汤中发挥主要作用,栀子单用具有一定的肝毒性,较小剂量时栀子的毒性可被大黄抑制,较大剂量时栀子抵消大黄的药效,全方配伍可减毒增效,具有一定的合理性。
三、药效部位中主要成分的HPLC初步分析
建立了HPLC指纹图谱色谱条件,对筛选出的茵陈蒿汤药效部位中的主要成分进行了初步分析,以标准品对照法鉴定了8个成分,其中没食子酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚来源于大黄,绿原酸和栀子苷来源于茵陈、栀子。
