流行性感冒(简称流感)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,起病急骤,传染迅速,具有一定的季节性。流感的流行,不仅直接危害着人们的健康,威胁人类的生命,而且也给人们带来了一定的经济损失。
在文献综述部分,本文首先从中西医对流感的认识和研究现状方面作了文献回顾;其次又对中西医关于机体抗流感的免疫调节机理方面做了文献研究。在理论探讨部分,交代分析了本实验所用的实验药物重楼克感滴丸的药物组成、组方特点及其临床应用情况。在正文部分,对本实验从以下四个方面做简要概述:
目的:
本实验以流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠为模型,观察重楼克感滴丸对FM,感染小鼠免疫功能的影响,探讨重楼克感滴丸免疫调节的作用机制,为重楼克感滴丸的临床应用提供实验依据。
方法:
1.研究重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠T细胞亚群的调节作用:
将ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、利巴韦林组、重楼克感滴丸大、中、小剂量组等六组,每组雌雄各六只。乙醚吸入法麻醉小鼠,麻醉成功后以4LD50病毒滴鼻感染小鼠,每只0.05mL,空白对照组小鼠用等量生理盐水滴鼻。小鼠感染后24h开始灌胃给予相应药物,每日1次,每次0.3ml,空白对照组和模型组每日给予等量生理盐水,共给药4天。感染第四天,禁食不禁水8h,小鼠眼眶取血,置于肝素抗凝管储存备用,按照流式细胞检测方法的要求,检测T细胞亚群的数量。
2.研究重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠炎性细胞因子的影响:
动物分组、造模、给药方法同上。小鼠灌胃4天后处死,无菌摘取肺脏,并按照1:9的比例加入冷的生理盐水匀浆后1500rpm,离心10m取上清,用ELISA试剂盒进行检测。
3.研究重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠网状内皮系统的影响:
动物分组、造模、给药方法同上。在第4日给药1h后,采用碳粒廓清法测定小鼠的吞噬功能。
4.研究重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠肺和血浆中内皮素水平的影响:
动物分组、造模、给药方法同上。小鼠灌胃4天后,摘眼球取静脉血1ml,置于含10%EDTA二钠30μL和抑肽酶400IU的试管中,混匀,3000rpm,离心10m,取上清200μl,待测。检测按照内皮素放射免疫试剂盒说明书提供方法进行。
结果:
1.重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠T细胞亚群的调节作用:
与空白对照组相比,模型组的CD3+、CD4+T细胞的比例明显下降,且有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,利巴韦林组CD3+、CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+的比值升高,均有统计学差异(P<0.05);重楼克感滴丸大、中剂量组的CD3+、CD4+T细胞比例均明显升高,重楼克感滴丸中、小剂量组均能明显降低CD8+T细胞的比例,重楼克感滴丸各剂量组CD4+/CD8+的比值显著升高,均具统计学意义(P<0.05)。
2.重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠炎性细胞因子的影响:
与空白对照组比,模型组小鼠肺匀浆中细胞因子IL-10的含量升高、TNF-α的含量明显升高,均有显著差异(P<0.05、P<0.001);与模型组比较,利巴韦林组和重楼克感滴丸中剂量组的IL-4含量明显增加,且有统计学意义(P<0.05);重楼克感滴丸大、中剂量组的IL-10含量显著增加,且有统计学差异(P<0.05);重楼克感滴丸中、小剂量组的IL-1β含量明显下降,且有统计学差异(P<0.05);重楼克感滴丸小剂量组的IL-6含量明显下降,且有统计学差异(P<0.05);利巴韦林组的TNF-α含量明显下降,且有统计学差异(P<0.05);重楼克感滴丸各剂量组的TNF-α含量显著下降,且有统计学差异(P<0.001),而且与利巴韦林组比较,亦有显著差异(P<0.05)。
3.重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠网状内皮系统的影响:
与模型组相比较,利巴韦林组与重楼克感滴丸各剂量组的吞噬指数均有升高,且有统计学差异(P<0.05)。
4.重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠肺和血浆中内皮素水平的影响:
与空白对照组比较,模型组小鼠血浆内皮素明显升高,且有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,利巴韦林组和重楼克感滴丸中、小剂量组血浆内皮素水平明显下降,且有统计学差异(P<0.05)。
结论:
1.重楼克感滴丸通过上调流感病毒感染小鼠的CD3+、CD4+T细胞亚群百分率及CD4+/CD8+的比值,下调感染小鼠CD8+T细胞亚群百分率,调节机体感染流感病毒后的免疫应答。
2.重楼克感滴丸通过促进感染小鼠抗炎性细胞因子IL-4、IL-10的表达,同时抑制促炎性细胞因子IL-1β、IL-6,TNF-α的过量产生,平衡调节流感病毒感染小鼠Th类细胞因子的表达水平而提高机体免疫功能。
3.重楼克感滴丸可激活单核巨噬细胞系统,明显提高流感病毒感染小鼠的网状内皮系统的吞噬能力,使其接近或达到正常小鼠水平。
4.重楼克感滴丸可能通过抑制流感病毒的复制,减轻病毒感染后的炎症反应,从而减少内皮素mRNA的表达和内皮素的释放,进而减轻内皮素对呼吸系统的损伤作用;
5.综上可知,重楼克感滴丸对流感病毒感染小鼠具有多方面的免疫炎症调节作用,可恢复机体的抗感染免疫平衡,达到抗病毒的作用。