小鼠卵母细胞中JAK2的表达与定位

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作者
李迎香
机构
[1] 南京农业大学
关键词
JAK2; 卵母细胞; 间接免疫荧光; 实时荧光定量PCR;
D O I
暂无
年度学位
2004
学位类型
硕士
导师
摘要
JAK2是Janus激酶家族中的一员,参与JAK-STAT信号通路,介导诸如生长激素、白细胞介素、GM-CSF等细胞因子和生长因子的信号传导,在细胞的增殖、分化等活动中起重要作用。JAK2通过使其下游底物STAT磷酸化并且转位至胞核,发挥其对基因的调控作用。研究表明绝大多数体细胞核中未发现JAK2蛋白,JAK2仅存在于细胞质中。然而最近有研究发现,小鼠卵母细胞的细胞核中存在JAK2。 采取完全生长的GV期和M Ⅱ期的小鼠卵母细胞,以间接免疫荧光试验检测发现,JAK2大量存在于细胞核中。 检测小鼠卵母细胞成熟过程中JAK2的定位发现,在小鼠卵母细胞的不同发育阶段,其核内都存在JAK2。通过实时荧光定量PCR实验,检测不同发育阶段卵母细胞中JAK2的表达量的变化。结果发现,随日龄的增加,JAK2的表达量也随之增加。 本试验还比较了JAK2在GV期卵母细胞和2-细胞胚细胞核中量的变化。结果发现2-细胞胚核中JAK2的量较GV期明显降低。 通过核移植,将NIH3T3体细胞核移入去核GV期和M Ⅱ期的卵母细胞中。荧光检测发现,体细胞核与去核GV期卵母细胞质构成的重组卵无论是否发生GVBD,核内均没有JAK2的出现。在去核和未去核的M Ⅱ期卵母细胞中移入体细胞核,JAK2仅存在于未去核MⅡ期卵母细胞的核内,并不转移到体细胞核内。核移植试验说明,成熟前后的卵母细胞质均不能将JAK2蛋白转入供体核内。
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页数:42
共 17 条
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