薏米提取物对大鼠溃疡性结肠炎防治作用研究

目的： 测定薏米提取物组成成分，并研究薏米提取物对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的Wistar大鼠溃疡性结肠炎（UC）的防治作用，并从抗氧化损伤、免疫调节以增强粘膜屏障保护等方面探讨其可能的作用机制。 方法： 1.薏米提取物成分测定：运用凯氏定氮法、液相色谱法、索氏抽提法、气相色谱法分别测定蛋白质含量、氨基酸构成、粗脂肪含量和脂肪酸组成；运用酶重量法测定总膳食纤维、可溶性膳食纤维、不可溶性膳食纤维含量，原子吸收法测定铁、锌含量，EDTA法、荧光法测定钙、硒含量，重量法测定灰分含量。 2.薏米提取物对UC防治作用研究：健康成年Wistar大鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，正常对照组、DSS模型组、薏米提取物干预组，除正常对照组饮水外，DSS模型组、薏米提取物干预组大鼠自由饮用5%DSS溶液用于制备大鼠UC模型。薏米提取物干预组用薏米提取物混悬液连续灌胃，其余两组等量蒸馏水灌胃。通过疾病活动指数（DAI）评分、结肠肉眼大体评分、组织病理学评分、肠壁厚度、脏器系数评价疾病一般情况、结肠形态和病理学改变。生化法检测血清MPO及血清和结肠组织SOD和GSH-PX活性、MDA含量及总抗氧化能力（T-AOC）。酶联免疫法（ELISA）检测血清TNF-α水平。免疫组化法反映结肠HSP70表达。实时荧光定量RT-PCR方法（SYBR Green相对定量法）测定结肠HSP70mRNA表达水平。 结果： 1.薏米提取物成分测定：蛋白质12.4%、氨基酸总和（17种，以谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸为主）11.62%、粗脂肪8.15%、6种明确的脂肪酸（以油酸、亚油酸、棕榈酸、棕榈一烯酸为主）、总膳食纤维15%（其中可溶性膳食纤维0.58%）、铁2.78mg/100g、锌1.16mg/100g、钙99.30mg/100g、硒4.07μg/100g、灰分0.645mg/100g。 2. DSS模型组大鼠DAI评分高于正常对照组及干预组，薏米提取物干预组DAI评分低于模型组但高于正常对照组，且随干预时间持续而逐渐降低。模型组结肠肉眼大体评分、组织病理学评分均显著高于正常对照组（P<0.01），肠壁厚度较对照组有增厚趋势，胸腺/脾脏系数无差别。薏米提取物能明显改善UC大鼠结肠大体形态、组织病理情况以及肠壁厚度。造模终点模型组血清MPO活性升高（P<0.05），干预组血清MPO活性低于模型组（P<0.05）。 3.模型组大鼠较正常组血清MDA含量增加且血清SOD、GSH-PX活性降低（P<0.05），薏米提取物能明显降低血清MDA含量（P<0.01），升高血清SOD、GSH-PX活性（P<0.01）和组织SOD、GSH-PX活性（P<0.05）。 4.模型组血清TNF-α表达水平高于正常组（P<0.05），干预组TNF-α表达水平低于模型组（P<0.01）但高于正常组（P<0.01）。 5.各组大鼠均不同程度存在HSP70蛋白表达，模型组HSP70IOD值高于对照组（P<0.05），干预组HSP70IOD显著高于其它两组（P<0.01）。 6.模型组HSP70mRNA表达水平高于对照组（P<0.05），干预组HSP70mRNA表达水平高于其它两组（P<0.01）。 结论： 薏米提取物能显著改善UC一般状况及炎症损伤，降低血清MDA含量，增加SOD和GSP-PX活性，提高HSP70表达水平并抑制TNF-α表达，通过抗氧化作用及免疫调节作用对DSS诱导的大鼠UC有防治作用。薏米提取物具有丰富的营养成分，具有良好的开发前景。