清热祛湿法对温病湿热证大鼠舌和胃组织AQP-1表达的影响

目的：通过建立温病湿热证大鼠模型,观察大鼠舌和胃组织AQP-1的表达变化,同时观察藿朴夏苓汤及其加味方药干预对上述指标的影响,从水液代谢的角度进一步探讨湿热病理机制和清热祛湿法清除湿热致病因子的作用机制。 方法：160只大鼠随机分为5组：正常对照组(A)、湿热模型组(B)、藿朴夏苓汤组(C)、加味藿朴夏苓汤组(D)、加味药物组(E),参照多因素复合造模方法建立湿热证大鼠模型,C、D、E组于第25天起予上述不同组方药物干预治疗7天,A组和B组灌胃生理盐水以平衡操作。于造模结束后4h、24h、48h、72h四个时间点处死大鼠,取舌、胃组织,常规病理切片并HE染色,光镜下观察组织病理学改变并评分,免疫组化法检测AQP-1的表达水平。 结果： 1、B组大鼠舌乳头和乳头之间上皮均表现为过度角化,角质细胞层、棘细胞层增厚,固有层可见较多炎细胞浸润,组织疏松水肿；肌层明显的血管充血,组织轻度水肿。C、D、E组较B组角质细胞层、棘细胞层变薄,固有层轻度炎细胞浸润,肌层无明显病理改变,D组与A组光镜下无明显差别。 B组大鼠胃黏膜组织充血水肿,结构疏松,皱襞断裂、萎缩,固有层和粘膜下层可见大量炎细胞浸润。C、D、E组大鼠胃粘膜结构清楚,黏膜充血水肿明显减轻,固有层可见散在的炎细胞浸润,D组与A组镜下无差别。 2、B、C、D、E组舌和胃组织病理学积分均在4h最高,随时间点逐渐下降,组内各个时间点两两比较均有显著性差异(p<0.01)；除D组72h时点舌组织病理学积分与A组比较无差异外(p>0.05),余各组在各时间点与A组比较均有差异(p<0.01)。药物干预后C、D、E组较B组病理学积分降低,各时间点比较均有显著差异(p<0.01),D组较C组和E组尤为显著,C组优于E组。 3、B、C、D、E组舌和胃组织AQP-1表达均增加,4h最高,随时间点逐渐下降,除C组舌组织AQP-1表达水平48h与72h比较无明显差异外(p>0.05),余各组内各时间点的比较均有差异(p<0.01)；除D组舌组织AQP-1表达水平72h与A组比较无差异外(p>0.05),各组在各时间点与A组比较均有差异(p<0.01)。药物干预后C、D、E组AQP-1的表达下降,各时间点比较有显著差异(p<0.01),下降水平D组>C组>E组。 4、舌和胃组织病理学积分与AQP-1表达均呈正相关(p<0.01)。 结论： 1、温病湿热证动物模型存在舌和胃组织AQP-1的过度表达,且与组织炎症水肿严重程度密切相关。 2、清热祛湿法清除湿热致病因子的关键是抑制炎症反应,减轻炎性水肿,通过下调AQP-1的表达,恢复组织细胞内外水的平衡而发挥治疗作用。 3、清热祛湿偏重不同组方对温病湿热证大鼠舌和胃组织AQP-1的表达有不同程度的下调作用,加味藿朴夏苓汤尤为显著,藿朴夏苓汤略优于加味药物组。