浙江地区腹泻病人气单胞菌毒力基因及抗生素敏感性研究

目的 通过调查浙江地区2010年夏季(6月份-9月份)门诊腹泻患者气单胞菌属的感染情况,分析气单胞菌的毒力基因的分布与抗生素的敏感性,为临床治疗和预防气单胞菌腹泻提供重要依据并为以后的研究工作打下基础。 方法 收集2010年6月到9月份浙江省各地区门诊腹泻患者的粪便标本,进行细菌、病毒和寄生虫病原学的全面研究。对于分离到气单胞菌,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)对气单胞携带的与腹泻密切相关的5种毒力,包括气溶素(aerolysin, AerA),溶血素(hemolysin, HlyA),细胞毒性肠毒素(cytotoxic enterotoxin, Act),不耐热细胞肠毒素(heat-labile cytotonic enterotoxin, Alt),耐热细胞肠毒素(heat-stable cytotonic enterotoxin, Ast)的基因片段进行扩增,同时采用纸片扩散法测定气单胞菌对于20种抗生素的敏感性。 结果 1.从2392份门诊腹泻患者粪便标本中共分离到205株气单胞菌,分离率为8.6%。在本次研究中共分离到气单胞菌的四个菌种,其中最多的是豚鼠气单胞菌,共96株(46.8%),其次是维氏气单胞菌温和亚种64株(31.2%)和嗜水气单胞菌43株(21.0%),分离到的维氏气单胞菌维氏亚种最少,只有两株(1.0%)。 2.这205株气单胞菌分离自199份粪便标本,其中6份标本同时分离到两种气单胞菌,从152份(74.1%)标本中只分到一种气单胞菌,剩余的41株(20.0%)气单胞菌是以与其他病原菌混合感染的形式存在的。 3.对气单胞菌腹泻相关的毒力基因的PCR检测发现hlyA, act, alt在气单胞菌中分布相对比较广泛,分别占21.0,25.4,28.3%,而只有2.6%和1.5%的菌株携带aerA和ast基因。5种毒力基因在不同的气单胞菌菌种之间分布存在差异,分离率最高的豚鼠气单胞菌携带毒力基因的比例却最少。 4.根据毒力基因的不同组合,我们发现了存在于气单胞菌中的11种基因型,其中47.3%的菌株携带一种或一种以上的毒力基因。只有2株(1.0%)嗜水气单胞菌携带所有的毒力基因。hlyA/alt基因型在嗜水气单胞菌中最为常见,占62.7%,以单一基因存在的基因型act在维氏气单胞菌中最为常见。而豚鼠气单胞菌多以不携带任何毒力的形式存在。 5.腹泻来源的气单胞菌除了对氨苄西林-舒巴坦,阿莫西林-克拉维酸,头孢唑啉,头孢西丁及四环素的敏感率分别为13.7,16.6,19.5,45.4和56.6%以外,对其他抗生素的敏感性在保持在80%以上。不同的抗生素的不同的气单胞菌种之间存在差异。 结论 1.浙江地区夏季门诊腹泻病人的的气单胞菌的分离率较高,而且在多数情况下气单胞菌是唯一的致病菌,这说明气单胞菌可能是该地区引起腹泻的重要致病菌。 2.毒力基因的分布在不同的气单胞种之间存在差异,不携带任何毒力基因的气单胞菌需要我们进一步的研究。 3.气单胞菌对于大多数的抗生素是敏感的,但我们要加强对耐药菌株扩散的控制。