油茶(Camellia oleifera)是我国南方特有的木本食用油料植物,它与油棕、油橄榄、椰子并称为世界四大木本食用油料植物。本文对油茶组织培养技术进行了试验研究,主要研究结果如下:
1、在油茶组织培养中,一年中的7月是油茶组织培养的最佳外植体采集时期,采用1年生油茶扦插新抽的嫩芽作为外植体比采用3年生新抽嫩芽作为外植体能更有效的提高诱导率,同时降低污染率和褐化率。
2、油茶带芽的茎段预处理后,用75%的酒精快速消毒30s和0.1%Hgcl2消毒6 min后,接种在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上芽和愈伤组织的诱导效果最好。不同油茶无性系的诱导率存在明显的差异,三个无性系(‘岑软2号’、‘岑软3号’和‘桂软11号’)的诱导率分别为57%、67%和33%。另外,愈伤组织在MS+6-BA0.6 mg/L+NAA2.0 mg/L增殖继代培养基上的增殖效果最好。
3、以下培养基条件最适合油茶组织培养:以MS为基本培养基、采用蒸馏水配置培养基、蔗糖30 g/L、琼脂0.51%、pH值5.8。接种后采取直接进行光照培养(光强为14001x左右,光照时间为12 h/d)与接种后先暗培养7天再进行光照培养处理相比,培养效果好。
4、油茶胚性愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4-D2.0 mg/L+KT 1.Omg/L,诱导率达到73%。胚性愈伤组织产生后,转入MS+6-BA0.6 mg/L+NAA2.0 mg/L胚状体诱导培养基中诱导率最高,也达到了73%。
5、油茶无菌胚苗的最佳培养基为:SH+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L