绿色木霉菌Tv-1菌株在烟草根部及叶面的定殖研究

绿色木霉菌(Trichoderma viride)Tv-1菌株是玉溪红塔烟草集团王革等从土壤中用诱捕法分离获得的。该菌株生长迅速，在田间对烟草黑胫病、赤星病等重要真菌病害具有良好的防治效果，其固体发酵制剂已经进行到中试阶段。 了解绿色木霉菌Tv-1菌株的部分生态学特性，将有助于其制剂的开发利用。本文通过对绿色木霉菌Tv-1菌株与烟草凝集素的凝集反应、对烟草的吸附性及沿根表的生长繁殖、产纤维素酶、对疫霉菌Ph1菌株的拮抗性等特性进行了研究。埋片法观察结果表明：绿色木霉菌Tv-1菌株在烟草根表面具有很强的繁殖能力，靠近土表处的定殖数量最多；烟草幼苗同绿色木霉菌Tv-1菌分生孢子悬浮液吸附试验表明：Tv-1菌株对烟株根圈具有明显的趋向性，靠近根圈，孢子萌发早且长势好，远离根圈，孢子萌发晚，且长势弱；绿色木霉菌Tv-1菌株的分生孢子悬浮液同烟草凝集素粗提液具有明显的凝集现象，这表明Tv-1菌株具有定殖烟草的能力；通过比色法测定Tv-1菌株液体培养物还原糖的浓度，结果表明：绿色木霉菌Tv-1菌株具有较强的产纤维素酶活性，羧甲基纤维素(CMC)酶、滤纸糖化酶最高酶活力可达149.35μg／ml.min，255.6μg／ml.min，而以往研究结果表明，纤维素酶的含量同菌株定殖能力呈正相关；平板上及生境内绿色木霉菌Tv-1菌株同疫霉菌菌株Ph1的拮抗机制的研究结果表明，两者之间存在位点竞争、营养竞争及重寄生现象。 能否在植株上定殖已成为评价生防菌优劣的一个重要指标。在烟草的根部及叶面撒施或喷施绿色木霉菌Tv-1菌株制剂后，定期取样用扫描电镜观察其定殖状况。结果表明：烟草根部及叶片对绿色木霉菌Tv-1菌株具有显著的吸附作用，吸附是生防菌株定殖植株的最初也是十分重要的步骤：绿色木霉菌Tv-1菌株在烟草外根圈能成功定殖，为其在烟株根表的进一步定殖提供了接种源；绿色木霉菌Tv-1菌株定殖(包括吸附过程)的优先位点主要有：根毛基部、自然孔口处、茎表和叶面腺毛基部以及叶面气孔周围和凹陷处，这些部位分泌物较多，利于Tv-1菌株生长繁殖；结果还表明：绿色木霉菌Tv-1菌株在适宜的侵入位点(如伤口、自然孔口)，可以部分进入植株内部并在一定范围内传导，绿色木霉菌Tv-1菌株在烟株内的传导能力在一定程度上反映了其在烟株体内同病原菌竞争空间和营养的能力。通过定期取样，用木霉半选择性培养基(TSM)培养计数绿色木霉菌Tv-1菌株的定殖数量，跟踪其在烟草根部及叶面的定殖动态。结果表明：绿色木霉菌Tv-1菌株在烟草根部的定殖数量在1个月内变化幅度不大，但均低于原始施入量，主要原因可能是土壤的抑菌作用；在叶面由于相对恶劣的生存环境，定殖数量较根部下降更为明显。 绿色木霉菌Tv-1菌株在植物根部定殖受到多种因子影响。利用平板培养的方法，研究生境的含水量、pH值、营养及烟草品种等对绿色木霉菌Tv-1菌株在烟草根部定殖的影响。用木霉半选择性培养基(TSM)分别在第三天、第六天、第九天取样计数，结果表明：在所测定的0.5％、1.5％、3.0％、5.0％、7.0％、9.0％等6种含水量处理中，偏高的含水量(7.0％、9.0％)及偏低含水量(0.5％)均不利于绿 孙超峨：绿巴木霉菌T。－1菌什在烟草氓部及叶血口b定蚀研穴 色木霉菌TV－l菌株的定值；在所测定的4刀、5刀、6．0、7刀、8刀、9刀等6种pH处 理中，偏酸性的 pH值（4刀、5刀、6刀）利干绿色木霉菌 TV－l菌株的定值，而偏碱 性PH值（8刀、9刀）抑制其定殖：在所测定的葡萄糖琼脂＊叶平板、水琼脂（WA 平扳、土壤浸渍液（SA）平板中，添加葡萄糖的GA平板能促进绿色木霉菌TV．l菌 勾 株的定殖：不同的烟草品种对绿色木霉菌TV．l 菌株的定殖也有不同程度的影响， 所测试的二烟 85、K346、G28、RGll、NC82、NC89等 6个品种中，云烟 85、G28、 NC89较适合其定殖。 绿色木霉菌TV－l 菌株定殖烟草后对烟株生长无不良影响，在一定程度上还能 促进烟株生长。喷施绿色木霉菌TV－1 菌株制剂后的烟株较未使用制剂的烟珠光合 作用速率增强、呼吸作用速率变化不明显，叶绿素含量增加。喷施后的烟株光合作 用速率、呼吸作用速率及叶绿素的含量分别为ZI．250mgCO。／din’Al、6厂81 mgCO。／din‘．hr、2．647mg／g 鲜重；对照烟株分别为 13．345mgCO。／din’．hr、 7石00mgCO，／din’．hr、2．23ling／g鲜重。