补肾调冲法对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢Smad3、P-Smad3表达水平影响研究

目的：在前期实验研究的基础上,进一步研究以“补肾调冲法”立法的通脉大生片对大鼠卵巢TGF-β/Smads信号转导通路的调控作用,探索中医补肾调冲法促卵泡发育的机制,从而为补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕提供科学依据。 方法：选取9日龄SD大鼠,通过给予颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型,根据大鼠阴道脱落细胞涂片的表现,筛选出造模成功的大鼠,随机分为七个组,分别为模型组、通脉大生片高剂量组(简称通高组)、通脉大生片中剂量组(简称通中组)、通脉大生片低剂量组(简称通低组)、来曲唑组(LE)、右归丸组、正常组,于大鼠第80日龄,分别给予相应药物进行干预,连续干预5周后股动脉取血并处死动物,迅速剥离大鼠卵巢,每组选取三只大鼠的卵巢组织,立即置于Eppendorf管中,储存于液氮中以备检测。采用免疫印迹法,检测各组大鼠卵巢Smad3及P-Smad3的表达水平。 结果： 1、与模型组相比,正常组、通高组、通中组、来曲唑组大鼠卵巢Smad3的表达水平较高,差异有显著意义(P<0.01),通低组、右归丸组的Smad3水平亦有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)；通脉大生片各剂量组中,通高组、通中组升高Smad3水平的效果明显高于通低组。 2、与模型组相比,正常组、通高组、来曲唑组、右归丸组大鼠卵巢P-Smad3的表达水平较高,差异有显著意义(P<0.01),通低组、通中组的P-Smad3水平亦有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)；通脉大生片各剂量组中,通高组升高P-Smad3水平的效果明显高于通中组、通低组。 结论： 1、成功复制了采用皮下注射丙酸睾酮法制造肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型。 2、通脉大生片能提高肾虚排卵障碍型不孕大鼠Smad3及P-Smad3的表达水平,进而改善卵巢局部的微环境。 3、通脉大生片通过对卵巢局部因子Smad3及P-Smad3的调控以促进卵泡的生长、发育和成熟卵泡破裂及卵子的排出。 4、说明中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕可以通过调控卵巢局部因子来实现,特别是通过对卵巢TGF-β/Smads信号通路的调控。