杨树菇产抗菌活性物质的研究

通过对14株食用真菌的抑菌试验筛选,发现杨树菇（Agrocybe aegerita）具有极强的抑菌作用,可以有效抑制细菌、霉菌和酵母菌的生长。对4株杨树菇的抑菌试验发现,各种杨树菇的抑菌效果和抑菌谱各不相同,筛选出抑菌活性最强,抑菌谱最广的一株杨树菇做为试验菌株。同时,对杨树菇的菌丝进行了液体发酵培养,发现其发酵上清液也具有很强的抑菌活性且菌丝体生长良好,菌丝球致密、均匀,易于液体培养。 采用单因子设计,并结合正交试验的方法,对杨树菇液体发酵培养基的碳源、氮源以及培养基成分最佳配比进行了优化,同时对发酵周期、温度、接种量、摇床转速、培养基起始pH值及其装量等液体发酵的一些基本条件进行了研究。结果得到的最优的组成为:土豆汁20%、麸皮汁6%、蔗糖1.5%、MgSO4·7H2O 0.05%、KH2PO4 0.3%。经研究得出的最适培养条件为:发酵周期8-10d,发酵温度26℃,发酵起始pH6.0～7.0,发酵培养基装量为140ml/500ml三角瓶,摇床转速150r/min,接种量10～15%（v/v）。 检测了发酵液及菌丝体提取物中抗菌活性物质对温度、紫外线、pH变化及蛋白酶的稳定性;利用pH纸色谱、捷克八溶剂系统纸色谱等方法对抗菌活性物质水溶性、离子特性等性质进行了早期鉴别,结果表明该物质为弱酸性、极性较强、能溶于水和极性有机溶剂,对温度、紫外线、pH值及蛋白酶较稳定。 通过有机溶剂萃取试验、活性炭吸附试验、离子交换和凝胶过滤柱层析试验提取纯化,得到了抗菌活性物质的纯品,经高压液相色谱检测仅有一个单峰,同时对活性物质的结构进行了紫外光谱、红外光谱和核磁共振的分析。 鉴于杨树菇本身味美、营养丰富和安全无毒的特点及其所产抗菌物质的广谱、高活性优点,其所产抗菌活性物质具有潜在的、重要的应用价值和理论意义,有望开发为一种新型绿色的食品防腐剂。