棉籽总黄酮抗抑郁作用及可能机制的研究

目的：评价棉籽总黄酮（代号：CTN-T）的抗抑郁作用，并探讨其可能的作用机制。 方法：（1）采用多种抑郁动物模型（小鼠悬尾、小鼠强迫游泳、大鼠强迫游泳实验和大鼠获得性无助模型）对CTN-T的抗抑郁活性进行评价。（2）采用抑郁药理学模型（5-HTP诱导小鼠甩头模型和小鼠育亨宾毒性增强模型）观察CTN-T对小鼠脑内单胺能神经功能的影响；运用高效液相色谱加电化学（HPLC-ECD）法检测CTN-T对大鼠前额皮层和海马单胺递质含量的影响；并运用荧光法检测CTN-T对大鼠、小鼠全脑单胺氧化酶活性的影响。（3）采用开场活动实验和酶联免疫吸附实验（ELISA），观察CTN-T对慢性应激大鼠行为学和血清皮质酮改变的影响，并应用免疫印迹（Western blot）法，进一步检测CTN-T对慢性应激大鼠海马脑源性神经营养因子（BDNF）、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（pCREB）、磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）蛋白表达的影响。 结果：（1）CTN-T单次(160～320 mg·kg-1，ig)或连续多次(60 mg·kg-1，每天2次，共7次，ig)给药，可以显著缩短小鼠悬尾不动时间；CTN-T连续(40～60 mg·kg-1，每天2次，共13次，ig)给药，可以显著缩短小鼠强迫游泳不动时间；连续7次给予CTN-T(20～60 mg·kg-1，ig)，可显著缩短大鼠强迫游泳不动时间；连续4天给予CTN-T(100～200 mg·kg-1·d-1，ig)可显著减少获得性无助大鼠的逃避失败次数。以上行为效应与经典抗抑郁药丙咪嗪一致。并且，在以上剂量范围内，CTN-T不影响小鼠自发活动，提示CTN-T具有明确的抗抑郁作用。（2）行为实验结果显示，CTN-T连续（7次）灌胃，在50～75 mg·kg-1剂量下显著增强5-HTP诱导的小鼠甩头行为；在60～120 mg·kg-1剂量下对育亨宾的毒性作用有增强趋势。HPLC-ECD检测结果显示，CTN-T(25～100 mg·kg-1，7次)连续灌胃，可以显著升高大鼠海马5-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）含量，大剂量时能够显著降低前额皮层5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量，显著降低海马和前额皮层5-HT转换率（5-HIAA／5-HT的比值）。荧光法检测结果，单次给予CTN-T(450 mg·kg-1，ig)可显著抑制小鼠全脑MAO-A和MAO-B活性；连续灌胃CTN-T(50～100 mg·kg-1，7次)可显著抑制大鼠全脑MAO-A和MAO-B活性。（3）慢性应激导致大鼠开场活动减少，血清皮质酮含量升高，应激同时伴随给予CTN-T(50～100 mg·kg-1，ig)或去甲丙咪嗪(DMI，10 mg·kg-1，ip)可以明显对抗上述改变；此外，Western blot检测结果显示，慢性应激导致海马BDNF、pERK、pCREB表达下降，伴随给予CTN-T(50～100 mg·kg-1，ig)或DMI(10 mg·kg-1，ip)可逆转之。 结论：CTN-T在多种抑郁动物模型上显示明确的抗抑郁作用，其作用可能与以下机制有关：1)增强中枢5-HT和NE神经系统功能，抑制单胺氧化酶活性；2)上调海马BDNF信号转导通路，从而促进神经营养和神经可塑性。