复方贞术调脂方对胰岛素抵抗的作用及机制研究

背景： 胰岛素抵抗在代谢综合征(MS)发展中发挥着重要的作用。中药复方贞术调脂方(FTZ)已经被用于改善高脂血症、动脉粥样硬化和其他与代谢紊乱有关的疾病。 目的: 观察复方贞术调脂方(FTZ)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞及代谢综合征（MS）大鼠的作用，并从对胰岛素信号磷脂酰肌醇-3-激酶(PI-3K)和胰岛素受体底物1(IRS1)蛋白表达的影响，探讨其作用机制，为开拓FTZ的治疗范围，阐明FTZ调节糖脂代谢的机制提供实验依据。 方法: 高浓度胰岛素诱导HepG2细胞使其产生胰岛素抵抗，用高中低三个剂量的FTZ干预后，葡萄糖氧化酶法检测HepG2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞胰岛素信号PI-3Kp85mRNA的表达，Westernblot检测HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白IRS-1表达。在体内，将60只雄性SD大鼠，随机分成正常大鼠组、MS组、阿司匹林大鼠组(200mg/kg)、FTZ高(6g/kg)、中(3g/kg)、低(1.5g/kg)剂量组，共6组，每组10只。采用喂养高热量饲料连续12周诱导MS大鼠模型。在造模第5周时，各实验组开始连续8周灌胃相应药物（10ml/kg），正常大鼠组和MS组则灌胃给予等量的生理盐水。实验过程中定期称重，给药结束后测定大鼠血清中空腹血糖(FPG)，空腹胰岛素(FPI)水平和脂质水平，并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用RT-PCR法检测MS大鼠脂肪组织给药前后PI-3Kp85亚基的mRNA表达水平。 结果: 模型细胞培养基上清液中葡萄糖含量高于正常细胞(P<0.05)。给予FTZ(1,25,100μg/ml)后, HepG2细胞培养基上清液中葡萄糖含量均低于模型细胞葡萄糖含量(P<0.05)。胰岛素抵抗细胞与正常细胞相比PI-3Kp85mRNA和IRS1的蛋白表达显著降低(P<0.05)。给予FTZ干预后，与胰岛素抵抗细胞相比PI-3Kp85mRNA和IRS1的蛋白表达显著增加(P<0.05)。此外与模型组相比，FTZ能显著降低MS大鼠血浆TC、TG、空腹血糖、胰岛素浓度及胰岛素抵抗指数(P<0.05或P<0.01)；可显著升高血中HDL-C水平，上调大鼠脂肪组织PI-3Kp85mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。 结论: FTZ可改善胰岛素抵抗HepG2细胞对葡萄糖的摄取，调节MS大鼠脂质水平，减轻体重、降糖、增强胰岛素敏感性，对实验性MS具有防治作用。FTZ还能够上调胰岛素信号PI-3K p85mRNA和IRS1蛋白质在胰岛素抵抗HepG2细胞和MS中的表达，可能是其改善胰岛素抵抗的作用机制之一。