基于纳米混悬技术的中药难溶性有效成分给药系统的研究

大多中药有效成分为难溶性药物,溶解度低、口服吸收差,如何提高中药难溶性有效成分的溶解度,已是当今中药制剂研究者密切关注的问题。纳米混悬技术作为新型的纳米技术,为提高药物的溶解度和生物利用度以及降低药物毒副作用等提供了有效的手段,在医药领域已被广泛应用。将纳米混悬技术应用到中药难溶性有效成分给药系统的研究中,是解决中药有效成分难溶性、提高其口服生物利用度最好的方法之一。 Herpetrione (PEDX)是从葫芦科植物波棱瓜的干燥成熟种子中提取分离得到的单体化合物。该化合物含量高而且抗乙肝病毒活性强,但是PEDX属于难溶性成分,口服生物利用度低,极大的影响了药物的吸收,成为限制其临床广泛应用的瓶颈。本文以波棱瓜子有效成分PEDX为模型药,采用国际先进的纳米混悬技术,进行中药难溶性有效成分给药系统的研究,为我国中药难溶性有效成分的纳米药物产业化提供示范。 本文对PEDX的提取工艺和精制纯化工艺进行了考察,确定了PEDX的制备工艺,同时建立了PEDX的质量标准,为波棱瓜子l类新药的开发奠定了基础。PEDX的最佳制备工艺为：将波棱瓜子干燥品进行粉碎,粉碎成粗粉；粗粉用5倍粗粉量的80%乙醇进行回流提取,提取三次,每次1小时,合并提取液；提取液静置24小时后,过滤,合并滤液,回收乙醇至无醇味,静置12小时后,分去油层,水溶液离心,沉淀加入石油醚脱去残留的脂肪油,然后用1倍量乙酸乙酯萃取4次,合并乙酸乙酯溶液,于50℃减压浓缩干燥,得粗品。粗品以8倍量溶剂(石油醚：丙酮(2：3))超声溶解,上中压硅胶柱(120g×3串联,200-300目),以石油醚：乙酸乙酯：丙酮(2：7：1)为流动相,检测波长240nm,流速120mL/min。收集馏分,回收干燥,即得。 本文采用高压匀质法制备了PEDX纳米混悬液(PEDX-NS),通过对制备工艺的考察,最终确定最佳制备工艺为：分别称取PEDX原料药3g、SDS0.6g、PVPK300.9g,加入300mL蒸馏水,充分搅拌混匀,8000r/min高速探头超声5次(1min/次)后,在压力为1000bar条件下高压乳匀10圈,得PEDX-NS。 为了提高PEDX-NS的稳定性,本文以外观、粒径变化差值、再分散性等为指标,对PEDX-NS的固体化工艺进行了研究,结果发现,冷冻干燥得到的纳米混悬剂均一,疏松,粒径变化小,复溶性好,而且在常温下稳定性良好,因此最终选择冷冻干燥技术作为PEDX-NS固体化的最佳方法。 本文考察了PEDX-NS冻干粉的理化性质。PEDX-NS冻干粉呈分布较均匀的颗粒状,平均粒径为286.3nm,PdI为0.183,Zeta电位为-26.9mV。X射线衍射结果表明,在高压均质和冷冻干燥的过程中,PEDX始终都是以无定型的状态存在的。本文还建立了PEDX体外溶出度测定方法,并对PEDX-NS冻干粉和PEDX原料药以及物理混合物的溶出行为进行了比较。结果显示,在60mmin内,PEDX-NS冻干粉的最大累积溶出率为86.87%,而PEDX原料药和物理混合物的最大累积溶出率分别只有38.15%和48.37%,PEDX-NS冻干粉的溶出速率明显优于PEDX原料药和物理混合物。 为了考察PEDX-NS的体内生物利用度,本文建立了HPLC测定PEDX血药浓度的方法,并以PEDX原料药为参比药,对PEDX-NS的体内药代动力学进行了研究。大鼠平均血药浓度曲线经DAS2.0程序拟合,确定PEDX在大鼠体内动力学行为符合二室模型。且与PEDX原料药相比,PEDX-NS的Ka、Cmax和AUC显著增加(P<0.01),Tmax显著减小(P<0.01),其中Cmax和AUCo-∝分别增加了144.96%和125.76%,Tmax缩短了50%。说明PEDX-NS较PEDX原料药更容易被体内吸收,PEDX-NS显著提高了PEDX的体内生物利用度。 综上所述,将中药难溶性有效成分PEDX制备成纳米混悬剂后,其体外溶出度和体内生物利用度都得到了显著改善。因此,将纳米混悬技术应用到中药难溶性有效成分的给药系统中,是解决中药难溶性有效成分溶解度小、口服生物利用度低的有效方法。