大青龙汤抗甲型H1N1流感病毒药效物质研究

大青龙汤出自张仲景《伤寒论》,由麻黄、桂枝、苦杏仁、炙甘草、大枣、生姜、石膏七味药组成,历经千余临床实践的经典方剂,具有发汗解表,清热除烦之功效,主治风寒表实重证而兼里有郁热者；临床研究表明,该方具有治疗感冒、高热症、无汗症、慢性支气管炎合并肺部感染、哮喘、急性肾炎等作用,疗效确切；现代药效学研究表明,该方具有解热、抗菌、抗病毒、提高巨噬细胞吞噬的功能。迄今为止,大青龙汤的研究主要集中于临床应用方面,其药效物质基础研究少见报道。 本论文将大青龙汤视为整体,采用超临界CO2萃取技术和系统溶剂法,将其提取分离为不同化学物质部位,即超临界CO2萃取物(A)、总多糖(B)、氯仿萃取物(C)、乙酸乙酯萃取物(D)、正丁醇萃取物(E)、水溶性物质(F)及石膏水煎液(G)。通过体外抗甲型H1N1流感病毒试验筛选研究,确定大青龙汤抗病毒有效物质部位为超临界CO2萃取物(A)和正丁醇萃取物质部位(E)。 采用气质联用(GC-MS)分析方法,对大青龙汤中桂枝-生姜药对超临界CO2萃取物的化学成分进行了分析鉴定,鉴定了其中55种化合物；参照国家药品食品监督管理局颁布的《中药注射剂指纹图谱技术要求(暂行)》,建立了大青龙汤正丁醇抗病毒有效物质部位的HPLC-UV指纹图谱,标定了18个共有峰,色谱峰清晰可辨,相似度良好,并对苦杏仁苷、芦丁、甘草苷甘草酸单铵盐四个指纹峰进行了归属。 本论文通过学科交叉的研究方法,初步诠释了大青龙汤的抗病毒的物质基础,为该经典方剂的临床疗效提供了科学依据,并为将其研制成医院制剂和中药新品种奠定了一定基础。