女贞子炮制工艺及质量标准的研究

女贞子系木樨科植物(Ligustum lucidum Ait)女贞的干燥成熟果实,收载于《中国药典》2005版一部。味甘、苦,性凉,具有滋补肝肾,明目乌发的功效。用于治疗眩晕耳鸣,腰膝酸软,目暗不明,须发早白。 本课题是国家重大科技专项“创新药物和中药现代化”研究的一部分,在原国家中医药管理局青年基金项目“女贞子酒制工艺实验研究”基础上进行的深入研究。具体内容如下: 采用溶剂和色谱方法对女贞子果实的80%乙醇提取物进行了化学成分的分离和纯化研究,从中分离得到特征性水溶性成分—特女贞苷约900mg,其中纯度98%以上的约100mg,依据化学和波谱分析方法进行了结构鉴定。 女贞子临床应用多以炮制品入药,且以酒制法为多。从1963年至2005年版《中国药典》均记载女贞子为加黄酒拌匀炖法或蒸法。关于女贞子的酒制,全国各地在加酒量和时间上,差异很大。为此,采用正交实验方法,以齐墩果酸为含测指标,加酒量(A)、蒸制时间(B)和烘干温度(C)为考察因素,对女贞子的炮制工艺进行优选。结果显示:A因素和C因素有统计意义,B因素无统计意义。影响酒制关键因素是加酒量,其次是烘干温度,结合外观色泽以及各地区传统炮制经验,确立了其炮制工艺:黄酒加入量为20%,蒸制时间为4h,烘干温度为70℃。将实验室工艺中试放大,进行质量标准研究,建立饮片质量标准,为规范饮片炮制和有效市场监控提供科学的依据。 建立了女贞子药材及中试饮片中齐墩果酸和熊果酸的HPLC测定方法,方法学考察表明:方法稳定可靠,重现性好,齐墩果酸、熊果酸的回收率分别为98.64%和98.25%,RSD分别为0.46%和1.05%。含量测定表明:14个产地女贞子药材齐墩果酸含量范围在0.719%～1.579%,熊果酸含量范围在0.176%～0.519%,齐墩果酸和熊果酸总量范围在0.907%～2.086%。中试饮片齐墩果酸含量范围在0.914%～1.640%,熊果酸含量范围在0.285%～0.484%,齐墩果酸和熊果酸总量范围在1.199%～2.114%。齐墩果酸、熊果酸无论在化学结构、色谱鉴别、分离条件和药理作用上都比较相近。建议药典在女贞子药材标准项下增加齐墩果酸和熊果酸总含量,规定总含量应不得少于1.0%,饮片含量应不得少于1.1%。 同时以特征性有效成分特女贞苷为指标,建立女贞子药材及中试饮片的HPLC测定方法,并进行了方法学考察,特女贞苷的回收率为101.97%,RSD为1.37%。12个产地女贞子药材中特女贞苷的含量范围在0.241%～4.451%之间,地区差异较大,这可能与样品产地、采集时间、样品初加工、样品储藏时间以及市售药材产地混乱等因素有关。中试饮片中特女贞苷的含量范围在0.260%～0.775%,与炮制药材相比,特女贞苷的含量有所下降,这可能与炮制前水洗、蒸制时间过长、烘干温度以及特女贞苷(环烯醚萜结构)本身性质等因素有关,建议(1)女贞子酒制,净选后,黄酒伴匀,低温干燥或直接