研究目的：
放、化疗是临床肿瘤治疗及预防术后复发的主要手段,而骨髓抑制又是放、化疗的主要副作用,骨髓抑制后,患者主要表现为血细胞减少,免疫力低下,贫血、易感染等,给疾病的恢复造成不利的影响。据报道,放、疗后病人多表现出低热,腰酸膝软,毛发脱落,手足心热,口咽干燥、脉细数,或面色苍白,乏力,脉细弱等虚热或血虚症状,重则脾肾阳虚,符合中医学肾阴亏虚的表现,由于阴阳互根互用,阴虚则阳无所依,日久不愈,必然导致阳虚。中医理论认为,肾主骨生髓,主藏精,主生长发育,为先天之本,元阴元阳之根。《张氏医通》言“血之源头在乎肾”,《景岳全书》曰“精足则血足”等。可见,精髓是化生血液的基本物质,赋予后天之根本。由此可知,一旦肾虚,阴阳之根乏源,精髓枯竭,即使有后天补养,也必然导致血液生化受碍,出现血虚之征。目前,通过补肾促进骨髓抑制小鼠造血功能恢复的实验研究报道较少。本实验拟选用六味地黄丸(Liuwei Dihuang pills,LDPs)和桂附地黄丸(Guifu Dihuang pills,GDPs)作为滋阴补肾和补肾助阳的代表方,探讨补肾对促进放化疗所致骨髓抑制小鼠造血功能恢复的影响,进一步了解补肾生血的作用机理,以丰富中医理论的科学内涵。
研究方法：
通过放化疗建立骨髓抑制小鼠模型,观察LDPs和GDPs对骨髓抑制小鼠外周血象的影响；通过造血祖细胞培养,观察两方对骨髓抑制小鼠三系造血祖细胞增殖分化的影响；通过流式细胞术,了解两方对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期及凋亡率的影响；通过检测外周血SOD、GSH-PX活性和MDA含量,了解放化疗所致骨髓抑制小鼠抗氧化酶活性及自由基水平变化,并观察两方对骨髓抑制小鼠抗氧化能力的影响。
研究结果：
1、外观与体重：造模完成后,实验组小鼠毛发竖立,体重减轻,体型瘦小,大多数小鼠活动烦躁易怒(易咬人),皮温较正常组高,饮水量增加；空白组小鼠毛发光滑,表现比较温顺、安静,体型稍大。经统计学分析,用药7天后,LDPs和GDPs高剂量组小鼠体重显著增加,与模型组比较均具有统计学意义,与空白组比较无显著差异。
2、外周血象：造模后,小鼠外周血RBC、HGB、WBC、PLT均显著降低,LDPs和GDPs对外周血象的恢复均有不同的促进作用。其中LDPs对RBC、HGB、PLT的作用优于GDPs,而GDPs对于WBC的作用优于LDPs,中、高剂量组都能使白细胞计数恢复到正常值水平。
3、骨髓造血祖细胞培养：LDPs和GDPs中、高剂量组均能增加红系、粒系、巨核系细胞集落数,并具有剂量依赖性。其中LDPs对红系和巨核系作用尤为显著,而GDPs对粒系的作用更为明显。
4、细胞周期检测：放化疗可引起细胞周期G0／G1阻滞,LDPs与GDPs均能提高骨髓有核细胞的S期和G2／M比例,显著降低细胞凋亡率。其中GDPs主要作用于S期,LDPs主要作用于G2／M期；表明LDPs与GDPs能促进骨髓有核细胞的分裂增殖并抑制其凋亡
5、抗氧化作用：放化疗所致骨髓抑制小鼠全血中SOD和GSH-PX活性均显著降低,MDA含量升高。LDPs和GDPs能够明显提高骨髓抑制小鼠全血中SOD和GSH-PX活性,降低MDA含量。但GDPs对升高GSH-PX活性作用优于LDPs组,而LDPs升高SOD和降低MDA的作用似乎优于GDPs组,提示了两方在抗氧化方面可能存在不同的机制。
研究结论：
1、LDPs和GDPs都能够不同程度改善骨髓抑制小鼠的体重及外周血象,但GDPs对白细胞的作用明显优于LDPs。
2、LDPs和GDPs都能够增加骨髓有核细胞数,并促进三系造血祖细胞的增殖,增加各系造血祖细胞的细胞集落数,促进造血功能恢复。
3、放化疗可使骨髓抑制小鼠细胞周期出现G0／G1阻滞,LDPs及GDPs能够促进骨髓有核细胞的分裂增殖,增加S期和G2／M期细胞比例,同时降低细胞凋亡率,但是,它们作用的周期有所不同。
4、放化疗可导致体内自由基的产生,LDPs和GDPs能够通过提高抗氧化酶活性,减少放化疗引起的对造血系统的自由基损伤,从而促进造血恢复。
综上所述,通过本实验的研究,提示通过补肾,或滋阴填精,或温助肾阳,均能填精充髓,使精血生发有源,从而达到补血的效果。
