裸花紫珠化学成分及其胶囊质量标准研究

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook. et Arn)为马鞭草科紫珠属植物，主要分布于海南、广东、广西地区，同时也是一种海南道地药材，生于平地至海拔1200m的山坡、谷地、溪旁林中或灌木丛中。其全草包括根、茎、花、皮均可入药，有消炎、止血、收敛、凉血、散瘀消肿、清热解毒、驱风祛湿之功效。用于肺咯血、胃肠出血、鼻衄、牙龈出血、创伤出血、风湿肿痛等症。 裸花紫珠干燥叶经粉碎后用乙醇回流提取，提取物依次以石油醚、乙酸乙酯正丁醇萃取。利用多种柱层析、反相中压液相色谱、高效液相色谱等分离方法，从正丁醇萃取部位分离获得了20个化合物。利用波谱和化学方法，确定19个化合物的化学结构，包括5个黄酮：木犀草素(1)、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、木犀草苷(3)、木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、柯伊利素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)，2个梓醇类：裸花紫珠梓醇A (6)、6'-O-caffeoyl-3,4-dihydrocatalpol (7)、3个环烯醚萜类：nudifloside (8)、7-O-E-p-coumaroyl-8-epi-loganic acid (9)、7-O-E-p-coumaroyl-gardoside (10)，1个二萜皂苷：3,12-O-β-D-二吡喃葡萄糖基-11,16-二羟基-8,11,13-三烯(11)、及6个三萜皂苷：2α,3α,19α,24-四羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、2α,3α,23,29-四羟基乌苏酸-12,19-二烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)、2a,3a,19a,23-四羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、2α,3α,19α,23-四羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、2α,3α,19α-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(16)、2α,3α,19α-三羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)，1个苯丙素苷类：异毛蕊花糖苷(18)、1个甾体类：β-胡萝卜苷(19)；其中化合物6、7、9、10、12、13、15、16为新化合物，化合物5、11、14为首次从紫珠属中分离得到。 根据裸花紫珠用药特点及前人从裸花紫珠中分离得到的化合物药理筛选活性结果，本论文在抗肿瘤、降血糖、保肝细胞药理模型上，对这些分离鉴定的单体化合物进行了活性筛选。药理结果如下：在抗肿瘤活性筛选中，化合物6对人肝肿瘤细胞株（HepG2）和人胃腺癌细胞株（BGC-823）两种肿瘤细胞表现出细胞毒活性，IC50值分别为3.37和2.49μM。在降血糖活性筛选中，19个化合物几乎没有显示出对PTP1B酶的抑制活性；对α-葡萄糖苷酶，化合物3，6和18表现出一定的抑制活性，抑制率分别为31.7%，58.7%和35.8%；在保肝活性筛选中，化合物6、9、10、12、13、14和16表现出对WB-F344大鼠肝上皮干细胞样细胞的D-半乳糖胺诱导的毒性中有显著的保肝活性。 本论文采用薄层色谱法（TLC），与裸花紫珠对照药材对比进行鉴别；采用高效液相色谱法测定木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量。选用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm），流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液（15:85），流速为1.0mL/min，木犀草苷检测波长为350nm，毛蕊花糖苷检测波长为330nm，柱温为35℃。结果TLC法鉴别专属性强，斑点清晰，分离度好；木犀草苷和毛蕊花糖苷进样量分别在2.26～90.24μg/mL (R2=0.9997)，8.90～356.2μg/mL (R2=0.9994)，范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系，平均回收率(n=9)分别为99.57%（RSD为1.98%）和97.46%（RSD为1.32%）。结果显示该方法准确、简便、重复性好，可作为裸花紫珠胶囊的质量标准控制。 对裸花紫珠胶囊质量标准研究旨在为其质量进行控制，以保证企业能生产出质量稳定、均一、合格的产品，保障人们用药安全。