三棱的活性成分和指纹图谱研究

三棱系黑三棱科黑三棱属植物黑三棱(Sparganium stoloniferum Buch. Ham.)的干燥块茎,具有破血行气、消积止痛等功能,是活血化瘀的中药。主要分布于我国东北、华北、华东及西南等地,分布广泛,资源丰富。具有破血行气、消积止痛等功能,是活血化瘀的中药。研究表明,三棱中含有挥发油类,黄酮类,有机酸类,苯丙素类和甾体类成分。具有抗血小板凝集和抗血栓作用,抗癌和抗炎镇痛作用,同时对心脑血管疾病有治疗作用,具有保肝和杀精作用。三棱在民间主治气血凝滞、经闭、产后淤血腹痛、饮食积滞、跌打损伤等病症。以三棱为主的复方制剂也广泛应用于临床治疗中,例如三棱莪术汤治疗冠心病稳定型心绞痛临床疗效显著,三棱和伤汤治疗胸部陈伤收到良好效果等。但是到目前为止没有对三棱有效部位和有效成分的深入研究,没有三棱有效成分与其药效相关联的报道。因此,阐明其化学成分和药理活性的联系,使三棱能够得到充分安全的应用,是目前该药亟需解决的关键问题。本文通过对三棱活性部位的筛选、三棱活性部位的化学成分的分离鉴定及分析,以及对三棱指纹图谱的建立三方面进行了研究,取得了以下结果： 首先,通过体外活性筛选实验证明三棱与其抗癌和心血管方面的活性相关的部位是小极性部位。结果表明,该部位在10μg/mL的剂量下对肝癌细胞株有明显作用,在1μg/mL剂量下对人脐静脉细胞株有明显作用,在10μg/mL剂量下对PMNs与ECV304黏附有明显抑制作用,在1μg/mL、0.1μg/mL剂量下对血小板与ECV304黏附有明显抑制作用,其黏附率与模型组比较有显著性差异,与正常组比较无显著性差异。通过对该部位化学成分的分离,并应用IR,'H-NMR,13C-NMR等波谱技术对化合物进行了鉴定,并应用HPLC及HPLC-MS等方法对该活性部分进行了辅助深入分析,确定活性部位的化合物以苯丙素类为主。 其次,本实验对三棱药材进行了HPLC指纹图谱的构建,建立并解析了21批三棱药材的指纹图谱,标定了13个共有峰,结合中药指纹图谱相似度评价软件,以及系统聚类分析和主成分分析等分析方法,对药材的质量进行了客观评价。相似度结果显示,各地药材与对照药材相比无显著差异。但对其进行聚类和主成分分析后发现,这21批药材可以分为两类,一类为对照药材,湖南和昆明产地三棱药材,这三种三棱的香兰素和三棱二苯乙炔成分含量较高；另一类为其他17批药材,与第一类药材相比上述化合物含量偏低。