滇重楼中甾体皂苷类成分的研究

中药重楼为百合科植物云南重楼[Paris polyphylla Smith var．yunnanensis（Franch）Hand Mazz]或七叶一支花[Paris polyphylla Smith var．chinesis（Franch）Hara]的干燥根茎，传统上作为一味珍贵的药材用于治疗咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛等症。现代药理表明其具有止血、抗肿瘤、免疫调节及心血管等活性。研究发现：重楼中的主要活性成分是甾体皂苷，且苷元不同、糖基不同，其药理活性也差别较大，因此有必要对其甾体皂苷类成分进行系统的分离鉴定和深入的药理活性研究，并探讨其构效关系，进而开发出疗效好、毒性小的新型药物，更好的应用于临床。 本论文通过多种分离纯化手段和结构鉴定方法，对中药重楼中的甾体皂苷类化合物进行了系统的分离鉴定，得到22个单体化合物和一对立体异构体的混合物（化合物12a和12b），其中6个新化合物（化合物1、2、8、12a、12b和15），2个首次从该属植物中分离得到（化合物20和23），3个为首次从该种植物中分离得到（化合物3、7和14），其结构分别为： （25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6）-烯-呋甾-3β，17α，22α，26-四羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷A，1）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-16，22-二酮基-△5（6），17（20）-二烯-呋甾-3β，26-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷F，2）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6）-烯-呋甾-3β，17α，22α，26-四羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（皂苷Th，3）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6）-烯-呋甾-3β，22α，26-三羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（Dichotomin，4）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6）-烯-呋甾-3β，22α，26-三羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（ParisaponinⅠ，5）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6）-烯-呋甾-3β，22α，26-三羟基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（原纤细薯蓣皂苷，6）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6），20（22）-二烯-呋甾-3β，26-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（伪原薯蓣皂苷Pb，7）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-△5（6），20（22）-二烯-呋甾-3β，26-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷B，8）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-17α，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（皂苷Tb，9）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-17α，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（重楼皂苷H，10）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-17α，3β-二羟基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1→3）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（11）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-7β，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷D，12a）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-7α，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷E，12b）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-17α，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（皂苷Tg，13）、（25R）-△7（8）-烯-螺甾-3β，5α，6α-三羟基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1→3）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（南重楼皂苷A，14）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-12α，3β-二羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（滇重楼皂苷C，15）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-17α，3β-二羟基-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（16）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（薯蓣次皂苷A，18）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（皂苷Pa，19）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→5）-α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（Reclinatoside，20）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（皂苷Pb，21）、（25R）-△5（6）-烯-螺甾-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（纤细薯蓣皂苷，22）和（25R）-△~(5（6）-烯-螺甾-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→5）-α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（Loureiroside，23）。 将分离得到的各单体化合物进行了细胞毒及心血管相关活性筛选，其中细胞毒活性研究表明：重楼中的螺甾皂苷类化合物大多具有细胞毒活性，以皂苷Pb的活性最强，其IC50值为0.13μg／mL；呋甾皂苷基本无此活性。在此基础上初步探讨了其细胞毒活性的构效关系，发现并证实了：F环闭合的螺旋甾烷型苷元母核及C-3位糖链的1→2连接的末端鼠李糖是甾体皂苷具有良好细胞毒活性的关键性结构特征；苷元上羟基的取代则对甾体皂苷的细胞毒活性有一定的抑制作用。这些都对抗肿瘤药物的分子设计和研究开发奠定了基础。