六味地黄丸对高血脂模型大鼠的血管保护作用及其机制研究

目的：观察六味地黄丸对高血脂大鼠的血脂、血糖、血管相关细胞因子、主动脉形态结构及血管脂联素mRNA、脂联素受体蛋白表达的影响,研究六味地黄丸对高血脂大鼠血管的保护作用及其可能的作用机制,为六味地黄丸在心血管疾病防治中的应用提供参考。 方法：将40只Wistar成年雄性大鼠分成正常对照组10只、模型组30只。采用高脂高糖饲料复制高血脂大鼠模型,8周后造模成功,模型组分成模型组、六味地黄丸组和辛伐他汀组。连续灌胃给药4周后,观察六味地黄丸对高血脂大鼠的血脂的影响,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的水平；HE染色光镜下观察主动脉组织的病理变化；采用ELASA法测血清脂联素的水平；采用RT-PCR方法检测高血脂大鼠主动脉中脂联素受体1(AdipoRl)和脂联素受体2(AdipoR2)mRNA表达；采用Western Blotting方法检测高血脂大鼠主动脉中脂联素受体1(AdipoR1)和脂联素受体2(AdipoR2)的蛋白表达变化。实验数据用x±s表示,采用SPSS16.0统计软件进行组间t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。 结果： 1、通过高脂高糖饮食诱导的高血脂模型与人类的高血脂具有相似的特征,可以用于高血脂的研究。 2、六味地黄丸组大鼠血清LDL-C比模型组明显降低(P<0.05),而TC、TG和HDL-C差别不显著。结果提示六味地黄丸可以调整紊乱的脂质代谢。 3、模型组血清NO低于正常组和六味地黄丸组。模型组血清NOS水平较六味地黄丸组降低。与高脂模型组相比,六味地黄丸可降低ET-1、IL-6和TNF-α的水平,同时升高血清脂联素的水平。结果提示六味地黄丸可以促进合成NO、NOS,降低ET的含量。 4、光镜结果显示,正常对照组的大鼠胸主动脉壁结构完整,内膜连续光滑,平滑肌细胞排列有序规则,均匀无萎缩；与正常组相比,模型组大鼠胸主动脉血管壁的内膜增厚,平滑肌细胞增生且排列紊乱；辛伐他汀组和六味地黄丸组没有很明显的病理改变。结果提示六味地黄丸能够减轻高脂高糖饮食所致的主动脉的内膜增厚和平滑肌细胞增殖。 5、RT-PCR结果显示,六味地黄丸可明显上调高血脂大鼠主动脉AdipoR1和AdipoR2的mRNA表达,并且AdipoR1的表达量多于AdipoR2。Western Blotting结果显示,六味地黄丸可明显上调高血脂大鼠主动脉AdipoR1和AdipoR2的蛋白的表达,并且AdipoR1的表达量多于AdipoR2。 结论：通过高脂高糖饮食复制的高血脂大鼠模型,可以用于高血脂及其并发症的研究。六味地黄丸可调节血脂代谢,改善血管内皮功能,抑制炎症反应,对高血脂大鼠主动脉具有保护作用。其作用机制可能与提高血清脂联素水平或上调脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)的表达等有关,进而起到保护血管的作用。脂联素的研究可能为高血脂、脂代谢絮乱及胰岛素抵抗的防治方面提供新的理论依据。