不同处方逍遥丸对肝郁脾虚证大鼠的干预效果研究

目的：逍遥散始载于《太平惠民和剂局方》,是治疗肝郁脾虚证的中医经典方剂,逍遥散中含有生姜,但其成方制剂——逍遥丸却有两种处方,一种含有生姜,一种不含有生姜,但功能主治相同。这种现象出现的原因目前尚未见到相关的研究报道。生姜的存在是否对逍遥丸治疗肝郁脾虚证有影响,进而关系到是否应修改其处方或适应症,本课题将进一步进行探讨。 方法：①研究对象：健康成年雄性SD大鼠；②处理方法：除阴性对照组外,其余各组均实施造模程序,给予应激刺激,刺激方法包括夹尾、禁水、禁食、4℃冰水浴、潮湿垫料,刺激顺序随机,同种刺激不能连续出现。造模即开始各给药组ig给药,模型组及阴性对照组给予等量纯化水,周期21d,于第21天晚禁食不禁水,第二天早上进行腹主动脉采血,进行NMR测定。③评价指标：从体征、旷场试验行为学(水平穿越格数、站立次数、修饰次数)两个方面进行考察,同时考虑到行为学三个指标之间存在时间的唯一性和排它性,故引入一个综合评价指标—RSR(采用秩和比法将三个指标转化为一个指标RSR),采用重复测量方差分析综合评价其行为学特征；采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对1H-NMR图谱的化学位移和峰面积进行分析。 结果：行为学指标评价：与阴性对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、站立次数下降幅度较大,组间差异均具有显著性(F穿越=9.687,P穿越=0.006；F站立=9.673,P站立=0.006),造模成功。两试验组分别与模型组比较均有差别,但与阴性对照组比较均无差别,说明两种处方的逍遥丸均有抗肝郁脾虚的效果；两试验组之间比较,差异无统计学意义,故没有足够的证据可以推断两种处方逍遥丸的整体疗效有差异。同时,在试验过程中,模型组大鼠的体重增长较为缓慢,含生姜逍遥组和无生姜逍遥组大鼠体重的增长趋势较之更为接近阴性对照组,佐证了行为学的结论。 代谢组学评价：PLS-DA分析轮廓图显示含生姜逍遥组和无生姜逍遥组均能够与模型组沿t1轴分开,但两组差异无显著性,提示两组对模型大鼠代谢产物整体回调作用基本一致。其中,与阴性对照组比较,模型组大鼠血清中a-葡萄糖、苏氨酸、氧化三甲胺、胆碱、谷氨酰胺、丙酮酸、乙酰乙酸、醋酸等8种小分子代谢产物差异均具有显著性(P<0.05),表明这8种内源性代谢物与肝郁脾虚证发病关系较为密切,可能是肝郁脾虚证潜在的生物标志物。经药物干预后,与模型组比较,两试验组中这8种代谢产物均具有不同程度的回调,除醋酸外,差异均有统计学意义,说明逍遥丸有抗肝郁脾虚的作用,但是两试验组间无差别。再者,有9种未知物,两试验组之间比较有差别,这说明生姜影响了模型动物体内的一些微观机制。但是这9种未知物,在体内参与何种代谢途径,目前尚不清楚,需进一步研究确认。这9种未知组分可能是逍遥丸制剂中是否含有生姜引起体内代谢差异的关键性生物标志物。 结论：综上所述,本课题可得出以下结论：1.行为学实验及结果表明,逍遥丸对肝郁脾虚证有较好的治疗作用,是否含有生姜对其整体疗效无显著影响。2.代谢组学结果表明,①逍遥丸对模型动物体内一些小分子代谢物有不同程度的回调作用；②是否含有生姜对模型动物体内某些小分子代谢产物的影响有差异。3.目前还没有足够的证据证明需要修改逍遥丸的处方或适应症。