独活及其醇提物延缓自然衰老小鼠脑老化的实验研究

目前世界人口老龄化趋势日益突出,脑是人体中最复杂、最精密、对老化反应最敏感的器官,脑老化问题日益引起人们的广泛关注。寻找延缓脑老化的有效药物和探讨其防治机理具有重要的现实意义。 独活始载于《神农本草经》,被列为上品。它虽为祛风湿、散寒之药,但还具有调补五脏,尤善补肾,化痰祛瘀,宣通脑络之功效,故“久服轻身耐老”。以往的研究表明,独活及其醇提物能改善D-半乳糖脑老化模型小鼠脑组织细胞膜流动性和膜老化指数,增强免疫功能和抗氧化能力,提高模型小鼠学习记忆能力。 目的:观察独活及其醇提物对自然衰老小鼠脑组织细胞形态、细胞凋亡及其基因调控、氧化损伤、学习记忆功能的影响,探讨独活及其醇提物延缓脑老化的作用机理。 方法:以自然衰老18个月龄的小鼠为脑老化研究对象;以小鼠水迷宫实验,测试其学习记忆能力;以电镜和光镜(HE、嗜银、刚果红染色)检测,观察小鼠脑组织细胞形态的变化;以流式细胞仪和免疫组织化学法,检测脑组织细胞凋亡率及其bcl-2、bax基因的表达:用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法,分别检测脑组织丙二醛(MDA)含量和血清超氧化物岐化酶(SOD)活性。 结果:自然衰老小鼠其学习记忆能力下降。其脑组织细胞形态学的变化:在光镜下可见海马神经细胞数量明显减少,细胞排列不整齐;大脑皮层神经细胞有细胞空泡变性。在电镜下可见神经元细胞和神经胶质细胞凋亡的早期改变及细胞老化改变,即核体积变小,核异染色体质增多、边聚,核畸型、形态不规则,核膜内陷、核膜间隙局部增宽、部分核膜破坏;线粒体嵴部分有破坏,粗面内质网轻度扩张、脱颗粒;脂褐素大量沉积。神经元细胞有髓神经纤维出现髓鞘分离。其脑组织细胞凋亡率高,bcl-2基因表达减少,bax基因表达增加。其脑组织MDA含量增加,血清SOD活性下降。独活及其醇提物能明显改善上述改变,且独活醇提物优于水煎剂。 结论:独活及其醇提物具有延缓脑老化的作用。独活及其醇提物可能是通过抗氧化损伤,调控细胞凋亡基因,而抑制脑组织细胞凋亡,进而改善脑组织细胞形态结构,提高自然衰老小鼠学习记忆能力,延缓脑老化。