NLRP3炎性体信号通路在急性痛风性关节炎患者中变化的研究

目的:检测NLRP3炎性体信号通路相关分子在急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis, AGA)及正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)中的表达水平并比较其差异性,探讨NLRP3炎性体信号通路在痛风炎症反应中可能的作用。 方法:(1)详细收集24例急性痛风性关节炎患者和24例正常人的临床资料,并分离PBMC。(2)用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测NLRP3炎性体在急性痛风性关节炎及正常对照组PBMC的基因水平,比较NLRP3、ASC、caspase-1基因在PBMC中的表达差异性;分析NLRP3、ASC、caspase-1基因与急性痛风性关节炎患者临床指标的相关性;并检测下游炎症因子IL-1βmRNA表达水平。(3)用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测下游炎症因子IL-1β和IL-18在急性痛风性关节炎及正常对照组血浆水平。(4)用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测ASC及caspase-1蛋白在PBMC的表达情况。 结果:ASC mRNA在AGA组的表达量显著高于正常对照组(0.0292±0.0214 vs 0.0095±0.0069,P<0.01),而AGA组NLRP3、caspase-1 mRNA的表达量均明显低于正常对照组( 0.0625±0.0841 vs 0.1330±0.1060,P <0.05;0.0247±0.0137 vs 0.1170±0.1560,P <0.01)。AGA患者ASC mRNA表达量与NLRP3 mRNA呈负相关(r= -0.450,P<0.05),与caspase-1 mRNA呈正相关(r= 0.604, P<0.01), AGA患者ASC mRNA的表达量与球蛋白、极低密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r分别为-0.547、-0.540,P均<0.05),caspase-1 mRNA的表达量与球蛋白、极低密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r分别为-0.773、-0.465,P分别<0.01、0.05)。AGA组IL-1βmRNA的表达显著低于正常对照组(0.215±0.225 vs 0.761±0.704,P<0.05);而血浆IL-1β水平高于正常对照组(35.37±4.89 vs 31.62±2.19,P<0.05),血浆IL-18水平高于对照组(2508.14±334.56 vs 1796.93±159.71,P<0.01)。AGA组ASC蛋白水平显著低于正常对照组(1.229±0.170 vs 1.977±0.163,P<0.01),caspase-1蛋白水平也显著低于正常对照组(0.786±0.074 vs 1.159±0.196,P<0.05)。 结论: NLRP3炎性体在急性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞中的异常表达可能在痛风炎症反应过程中发挥重要作用。