杜仲籽粕提取物对骨质疏松大鼠的免疫调节作用研究

骨免疫学认为免疫系统与骨系统间存在相互作用,免疫系统能够通过RANKL/RANK/OPG系统调节骨代谢。最新研究还发现免疫功能下降与绝经后骨质疏松(PMOP)的发病密切相关,而杜仲具有补肝肾、强筋骨等功效,常用于治疗PMOP,而且杜仲的皮、叶、雄花均可提高机体的免疫力。本课题前期在体外实验研究中发现杜仲籽粕提取物(ESE)可以促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用,且PMOP模型大鼠在接受ESE治疗后骨密度、骨骼强硬度都有所提高,骨组织微结构得到改善,而且PMOP模型大鼠OPG/RANKL比率升高的同时雌激素水平没有受到影响。据此我们提出ESE可通过免疫调节途径治疗PMOP的设想,所以本课题从脏器、血液多角度,在系统、细胞、分子多水平上研究ESE通过免疫途径抗PMOP的药效物质和作用机制,从而探讨中药扶正固本—补肾—壮骨的内在关系。采用MTT法分别研究ESE含药血清、ESE及ESE的主成分桃叶珊瑚苷(AU)对体外免疫细胞活性影响发现,ESE含药血清、ESE及AU均可以增加腹腔巨噬细胞与脾淋巴细胞的活性,而对胸腺细胞没有明显促进作用。这表明ESE可以提高腹腔巨噬细胞与脾淋巴细胞的活性,而且AU是ESE体外调节免疫细胞活性的主要有效成分。采用双侧卵巢切除是构建PMOP大鼠模型,通过体外实验、流式细胞术、ELISA法、免疫比浊法探讨ESE治疗PMOP模型大鼠的作用机制。研究发现ESE可以显著升高大鼠脾脏指数,升高免疫球蛋白(1gG和1gM)、补体(C3和C4)水平、增加大鼠腹腔巨噬细胞活性,增加脾脏中CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg的表达及CD4+/CD8+,提高胰岛素样生长因子(IGF-1)含量,降低肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-6(IL-6)含量。表明ESE治疗PMOP模型大鼠时,不仅能够提高PMOP模型大鼠免疫力,还可以提高其免疫监控能力,从而更好的维持免疫系统平衡,且ESE治疗PMOP模型大鼠的作用机制与其对免疫系统的调节作用有关。研究表明,ESE对免疫系统具有调节作用,且ESE对PMOP模型大鼠的免疫调节作用是其治疗PMOP的作用机制之一,该理论为探讨中药扶正固本—补肾—壮骨的内在关系提供了实验基础。