高血压病左室肥厚模型病证评价及滋水降火饮干预研究

高血压是常见的心血管疾病 高血压患者约有1 3出现左室肥厚(1eftventricularhypertrophy LVH) LVH 是人类心血管疾病死亡的主要危险因子之一 是猝死 冠心病和充血性心力衰竭的 独立的 主要的危险因素和预测指标 机制尚未完全阐明 对其逆转是高血压病治疗的最终目标 之一,对其机制的探讨是目前研究的热点 随着对高血压病理生理机制研究的深入 认识到 LVH 的本质在于心脏自身的调节能力的损害 正常生理状况下心脏本身的负荷需求和自身能量代谢之 间能够形成一种动态平衡并将其维持在正常的生理范围内 而在各种病理性因素的持续刺激下 这种平衡被打破并被引向不利的方向 进而导致心肌肥厚的发生 因此 对高血压的治疗战略也 由主要关注血流动力学的改善向更加注重对靶器官的保护和逆转 进而提高生命质量的转变 研究目的 中医药治疗高血压病已取得较大进展 对其伴发的 LVH 的临床研究表明 以滋阴潜降 活 血化痰等常用治疗方法也取得了较好的疗效 但对中医药作用机制的研究尚待进一步探讨 滋水 降火饮为导师高尔鑫教授治疗高血压病阴虚证的经验方 临床应用表明有较好的降压和改善临床 症状的作用 前期的实验研究表明 本方能预防和治疗 2KIC-RHR 模型的 LVH 本研究在前期 研究的基础上 从中医学的整体观出发 通过对模型动物的宏观证候学动态观察和相关微观指标 检测 进一步探讨模型动物的证候学特征及其演变规律 同时探讨滋水降火饮对实验性高血压 LVH 的干预作用及对心肌细胞凋亡及其相关基因的调控机制 为临床运用和药物开发提供理论和 实验依据 研究方法 本研究采用缩窄大鼠一侧肾动脉建立 2K1C 肾性高血压 LVH 动物模型 以滋水降火饮于造 模后一周干预 并以依那普利作阳性对照药 运用症状观察 电生理技术 病理学 免疫组化和 分子生物学等研究手段 观察模型动物 LVH 形成过程中不同时间点动物生物学特征 血流动力 学 左室质量指数 心肌细胞凋亡及相关基因的表达等动态变化 多层次 多角度探讨高血压LVH 形成的病理生理机制及中医学证候变化的特点 尽可能以定量研究替代定性观察 对模型动物不 同的发展阶段进行证的评价 以建立可重复的病证结合动物模型 同时利用中药复方滋水降火饮 对模型动物早期给药的研究 观察中药对模型不同阶段左室肥厚及相关病理机制的影响 研究结果 1 2K1C 高血压LVH 的建立和评价 1.1 造模后一周大约有80%的大鼠形成高血压 血压升高稳定 血压升高快 造模后四周后模型 大鼠心肌显著肥大 左室肥厚指数较假手术组显著升高 与假手术组相比 P<0.01 0.05 以后 随着血压的持续增高 8 12周更为显著 早期心功能代偿性增强 以后舒缩功能逐渐下降 1.2 模型组在造模后 随着 LVH 的出现 其在上病理上的变化包括心肌细胞肥大 胶原组织增 生及亚细胞形态和结构的改变 是左室重构后心功能降低的病理基础 1.3 中药复方滋水降火饮早期给药 可降低模型动物血压 与西药组比较 尽管降压作用较缓 但可有效地提高心肌舒张收缩功能 延缓左室肥厚的形成 改善心肌的相关病理变化 提示滋水 2 高血压病左室肥厚模型病证评价及滋水降火饮干预研究 降火饮可能通过多种途径发挥其治疗作用 2 对模型动物的中医证候学观察及滋水降火饮的干预 2.1 模型动物早期出现易激惹程度增高 饮水量增加 尿量减少 体温稍高 心率增快 转台旋 转时间缩短等一系列类似阴虚阳亢证的特点 随着血压的升高和持续存在 有进一步加重的趋势 2.2 对模型动物 HRV 的检测发现 模型大鼠心率四周后心率较对照组模型加快 TV 增大 RRI 缩短 LF/HF升高 提示模型大鼠心率自主神经调节以交感神经为主 2.3 12 周时部分模型动物由易激惹 反而表现为活动度下降 神情萎顿 攻击性减弱 结合此 阶段模型动物的心肌舒缩功能的严重降低 呼吸频率增快等 提示模型动物后期在阴虚的同时 随着病情的发展 伴有气虚证的出现 对血小板聚集率和粘附率在造模后四周检测发现 模型组 较假手术组显著增高 P<0.01 8 12 周时更加明显 结合此阶段模型大鼠心肌肥厚的形成及心 率变异性的改变 提示模型动物在中后期血瘀渐成 因此 后期模型动物的由早期的阴虚阳亢 为主逐渐兼有气虚和血瘀 2.4 使用滋滋水降火饮于造模后一周干预表明 本方能明显地改善模型大鼠的证候学改变 调整 自主神经功能 降低模型大鼠的血小板聚集率和粘附率 效果优于依那普利阳性对照组 3 对心肌细胞凋亡的观察 3.1 DNA 条带分析显示 在造模后在1 12 周两个时间点可发现200 400bp 的梯形DNA 条带 3.2 TUNEL 法检测发现 光镜下正常心肌细胞核呈蓝色 而凋亡心肌细胞核呈棕黄色 在术后 各时间点模型组大鼠左室心肌细胞核内均可见散在的棕黄色的阳性颗粒 以术后 1 周和 12 周更 为明显 模型组凋亡细胞凋亡百分率和阳性细胞平均光密度均较假手术组显著升高 各治疗组8 12 周与模型组比较 心肌细胞凋亡率和阳性细胞平均光密度显著降低 P<0.01 但与假手术组相 比 心肌细胞凋亡率和阳性细胞平均光密度仍有较大差异 P<0.01;中药大小剂量组及西药组之间 相比 无显著性差异 3.3 电镜观察在模型组各时间段心肌细胞均未未发现典型