目的:观察益精方对腺嘌呤法诱导的肾阳虚不育大鼠的精子密度和精子活动率、血清激素水平以及claudin/occlaudin蛋白表达的影响。
材料与方法:选用48只健康的SPF级Wistar雄性大鼠,3月龄,体重180±20g,随机分为空白组,模型组,复方玄驹组,益精方组,每组12只。除空白组外,其余各组均以腺嘌呤1mL/(100g·d)的剂量连续灌胃12天;从第13天开始,空白组及模型组用等量生理盐水灌胃,复方玄驹组以复方玄驹胶囊水溶液灌胃,益精方组以益精方汤剂灌胃,每天一次,连续20天。实验结束后用10%水合氯醛麻醉大鼠,无菌条件下于腹主动脉取血10mL,摘取睾丸和附睾,采用计算机精子分析系统计数精子密度和精子活动率;采用酶联免疫竞争法和酶联免疫双抗体夹心法分别检测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)和血清抑制素B(INHB)的水平,用免疫组化法检测claudin/occlaudin蛋白的表达,显微镜下观察HE染色的睾丸组织结构。
结果:
1.与空白组比较,模型组精子活动率、精子密度、T以及INH B水平均降低,E2水平升高,claudin/occlaudin蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.01);
2.与模型组比较,复方玄驹组和益精方组精子活动率、精子密度、T和INH B水平均升高,E2水平降低,claudin/occlaudin蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);
3.与复方玄驹组比较,益精方组精子活动率、精子密度、T和INH B水平略升高,E2水平略降低,差异无统计学意义(P>0.05);claudin/occlaudin蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:
1.腺嘌呤能够降低精子密度、精子活动率和血清激素T、INHB的水平,升高E2水平;同时使claudin/occlaudin蛋白的表达减少;
2.益精方能够提高腺嘌呤诱导的肾阳虚模型大鼠的精子密度、精子活动率和血清激素T、INHB的水平,降低E2水平;同时使claudin/occlaudin蛋白的表达增多。