脑血宁注射液血清药物化学及药代动力学研究

脑血宁注射液是由北京中医药大学研制的复方中药制剂，由羚羊角、牡丹皮、栀子、石菖蒲等四味中药组成，具有平肝息风，活血化淤，豁痰开窍等功能，适用于高血压性脑出血的治疗，目前该药正处于临床研究阶段。本文采用高效液相色谱法对脑血宁注射液的血清药物化学进行了研究，在此基础上，结合文献资料，确定了该注射液在人体内的两种有效成分—栀子苷和丹皮酚，并以栀子苷和丹皮酚作为脑血宁注射液药代动力学研究的指标，分别对二者在人体内的药代动力学过程进行了研究，从而从不同侧面反映了脑血宁注射液在人体内的药代动力学行为，为该药的上市和临床合理应用提供基础研究资料，并对中药复方药代动力学的研究方法进行了初步探索，具有一定的理论及实际意义。 本文的研究分3个部分： 1、脑血宁注射液的血清药物化学研究 首先，进行了脑血宁注射液体外成分分析方法的研究，建立了脑血宁注射液的HPLC指纹图谱，采用夹角余弦和相关系数法评价了指纹图谱的相似性，并在相同条件下，测定了各味生药的HPLC指纹图谱，初步确定了脑血宁注射液中各色谱峰的归属；在此基础上，利用所建立的体外成分分析方法，对静脉滴注脑血宁注射液后1h时的人血清药物化学成分进行分析，建立了脑血宁注射液的人血清色谱指纹图谱，通过体内、体外两种色谱指纹图谱的比较分析，确定了人血清中来源于脑血宁注射液的原形成分及代谢物。然后通过与脑血宁注射液、各生药及标准品的色谱图谱的对照分析，确定了血中移行成分的来源。在认定的3种移行成分中，化合物Ⅰ为栀子苷，为栀子所含成分直接入血；化合物Ⅲ为丹皮酚，为丹皮所含成分直接入血；化合物Ⅱ在在体外图谱中未找到对应成分，提示其为新产生的代谢产物，其结构有待于进一步确证。 2、栀子苷人体药代动力学的研究 首先建立了测定人血浆及尿液中栀子苷浓度的高效液相色谱法，在此基础上研究了栀子苷在人体内的药代动力学行为。研究结果表明，健康志愿者静脉滴注脑血宁注射液100 mL（含栀子苷120 mg）后，栀子苷在人体内血药浓度迅速下降，其药时过程符合一室模型，主要药代动力学参数分别为：Tmax：1.15±0.24 h；Cmax：3.261±0.947μg.mL-1；t1／2：0.56±0.25 h；Ke：1.44±0.51 h-1；CL：0.4712±0.1637L.（h.kg）-1；Vd：0.3463±0.1125 L.kg-1；AUC0→t：4.562±1.431μg.h.mL-1；AUC0→∞：4.728±1.476μg.h.mL-1。给药后10 h内，尿中原形药物的累积排泄量为70％，该结果提示肾脏清除是静脉给药后人体内栀子苷的主要消除途径。 3、丹皮酚的人体药代动力学研究 建立了测定人血浆及尿液中丹皮酚浓度的高效液相色谱法，并研究了丹皮酚在人体内的药代动力学过程。研究结果表明，健康志愿者静脉滴注脑血宁注射液100 mL（含丹皮酚120 mg）后，丹皮酚在人体的血浆药物浓度时间曲线过程符合二室模型，主要药代动力学参数分别为：Tmax：0.942±0.35 h；Cmax：765±195 ng.mL-1；t1／2α：0.597±0.25 h；t1／2β：4.5±3.01 h；k10：0.76±0.43 h-1；k12：0.504±0.32 h-1；k21：0.298±0.19 L.（h.kg）-1；CL：1.706±0.41 L.kg-1；V1：1.706±0.41 L.kg-1；AUC0→t：1537.7±528.7 ng.h.mL-1；AUC0→∞：1739.7±572 ng.h.mL-1。静脉注射给药后，只有占给药量0.04％的丹皮酚以原形从尿液排出，该结果提示丹皮酚在体内广泛代谢，其代谢过程有待于进一步研究。