参芪鼻炎颗粒治疗变应性鼻炎的药效学评价及机制研究

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是以鼻黏膜病变为主的慢性炎症性疾病,近年来,随着变应原种类的增多,AR发病率呈逐年升高趋势,流行病学研究统计,全球AR发病率高达10%～25%,我国的发病率超过35%[1]。特应性个体吸入刺激物就会诱发AR,且病情反复发作,很难得到有效的控制,给患者和家庭甚至社会都造成很大的负担。该病发病机制至今还不清楚,病因复杂,现代医学认为固有免疫系统和适应性免疫系统失衡以及环境因素、遗传因素在AR发病过程中扮演重要角色。目前,临床上用于治疗AR的一线药物仅是对症治疗,只能缓解AR的鼻部症状,很难实现对变态反应的调节,且副作用多;而传统中药的多成份、作用的多系统、靶点的多样性等特点对机体免疫系统的调节具有天然的优势。所以针对AR的病因、病机,利用传统中药这个天然宝库,开发治疗AR的中药新药成为了关注的焦点。从中医角度讲,AR属于“鼻鼾”范畴,病因与风邪、疫毒入侵鼻窍,导致脾、肺功能紊乱有关。参芪鼻炎颗粒是按照现代中医理论组方的中药复方制剂,由十味中药组成,白芷配黄芪共为君药,臣以金银花、薄荷、大青叶、蒲公英,佐以黄芪、党参、仙鹤草,细辛为使;全方宣通鼻窍,解毒除渊,益气固表。该复方中药在新疆等地普遍用于临床治疗AR,并具有很好的效果,现按照原配伍处方剂量经过提取制成了成药颗粒剂,用于治疗AR。本研究旨在考察参芪鼻炎颗粒对AR的治疗作用,并阐明参芪鼻炎颗粒抑制AR发展可能的作用机制。建立经典的鸡卵清蛋白(Albumin chicken egg grade V,OVA)致敏Wistar大鼠的AR动物模型,评价参芪鼻炎颗粒对AR的治疗作用,利用IgE致敏的肥大样细胞RBL-2H3模型探索参芪鼻炎颗粒的抗过敏作用,以及在大鼠脾脏淋巴细胞水平考察参芪鼻炎颗粒的免疫调节作用。从而在整体动物水平和细胞水平明确参芪鼻炎颗粒对AR的治疗作用并探索其可能的作用机制,为参芪鼻炎颗粒抗AR的临床应用提供理论基础。第一章:参芪鼻炎颗粒治疗AR的药效学评价本实验以OVA为致敏原建立AR大鼠动物模型,对参芪鼻炎颗粒治疗AR的药效进行评价。研究结果表明,参芪鼻炎颗粒可以显著减少AR大鼠挠鼻、打喷嚏的次数,参芪鼻炎颗粒可以抑制AR大鼠鼻黏膜的病理变化,减少嗜酸性粒细胞的浸润数量,减轻了鼻黏膜肿胀;参芪鼻炎颗粒可以防止鼻黏膜的损伤,降低AR大鼠的鼻黏膜通透性;此外参芪鼻炎颗粒可以降低AR大鼠血清中炎性因子IL-4、IgE的含量,提高IFN-y含量。IFN-y和IL-4分别为Th1、Th2特异性细胞因子,由此推测参芪鼻炎颗粒在治疗AR中可能发挥了免疫调节的作用。第二章:参芪鼻炎颗粒抗过敏性炎症作用研究肥大细胞的脱颗粒反应和炎性介质的释放是引发过敏反应的重要原因,本章利用IgE致敏RBL-2H3细胞模拟肥大细胞的脱颗粒反应,探索参芪鼻炎颗粒对肥大细胞脱颗粒及释放炎性介质的影响。结果表明,参芪鼻炎颗粒可以抑制肥大细胞释放组胺,抑制其脱颗粒反应发生,提示参芪鼻炎颗粒可能通过抑制肥大细胞的脱颗粒反应发挥抗过敏性炎症的作用。第三章:参芪鼻炎颗粒的免疫调节作用研究生理情况下,机体T细胞分化为不同亚型的辅助性T细胞而释放不同的细胞因子,保持机体正常的免疫调节。在AR的发展过程中,Th1、Th2的分化以及细胞因子的表达量发生变化,打破了他们之间的平衡关系。本章依托原代培养的大鼠脾脏淋巴细胞,考察了参芪鼻炎颗粒对Th1和Th2分别的细胞因子释放、以及转录调控因子的影响。研究结果显示,参芪鼻炎颗粒可能通过调控转录因子T-bet、GATA3的表达,从而影响了 Th1、Th2的分化,进一步抑制了 Th2表达的IL-4水平和提高了 Th1表达的IFN-γ水平。提示参芪鼻炎颗粒可能通过免疫调节作用逆转了 AR中Th1/Th2的比例失衡发挥抗AR的作用。综上所述,本论文从整体动物水平评价了参芪鼻炎颗粒对AR大鼠行为学以及鼻黏膜病理变化的影响,并从细胞水平探讨了参芪鼻炎颗粒对肥大细胞脱颗粒及脾脏淋巴细胞分化的作用及作用机制,为该中药新药在临床治疗AR提供了实验依据。