复方中药玉屏风多糖的免疫调节作用及其机理的研究

复方中药玉屏风多糖的免疫调节作用及其机理的研究 玉屏风散是中医益气固表的代表名方，在近代临床医疗中被广泛地应用于与免疫功能失调有关的多种疾病的治疗。近代药理学研究发现，玉屏风散对免疫功能具有调节作用。运用药物化学与药理学密切结合的方法，从玉屏风散中筛选分离出活性部位玉屏风多糖，本研究旨在评价玉屏风多糖的免疫调节活性，并探讨其免疫调节作用的机理。 1：目的：运用药物化学与药理学密切结合的方法，将玉屏风散视为一个整体，从汤剂出发，在药理学药效指标的指导下，对其发挥免疫调节作用的活性部位进行筛选。 方法：采用环磷酰胺(Cy)诱导的免疫功能低下小鼠作为整体动物模型，采用脾淋巴细胞的定量溶血试验(QHS，抗体生成试验)和LPS、ConA诱导的淋巴细胞增殖反应作为评价免疫功能的指标。 结果：按极性把玉屏风散分为醇沉和醇溶性两部分，二者均具有改善Cy处理小鼠免疫功能的活性。继续对醇沉部分分级沉淀，获得三个沉淀部分，其中50％醇沉部分免疫活性较强。 结论：提示50％醇沉部分可能包含调节免疫功能的活性成分。 2：目的：玉屏风多糖(YPF-P)是50％醇沉部分纯化获得的多糖成分。本部分实验用非特异性免疫及体液免疫、细胞免疫的相关指标，评价YPF-P对Cy诱导的免疫功能低下小鼠的免疫功能的影响。同时以免疫功能低下的迟发型变态反应(DTH)小鼠脾淋巴细胞为靶细胞，观察了YPF-P对其影响，为阐明YPF-P作用机理积累实验资料。 方法：采用Cy诱导的小鼠免疫低下模型，分别测定腹腔巨噬细胞(PMO)吞噬功能和NK细胞杀伤活性，以及脾淋巴细胞的定量溶血及LPS、ConA诱导的淋巴细胞增殖反应。并采用DNFB诱导的DTH观察细胞免疫功能：采用三色流式细胞技术分析脾细胞淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+细胞亚群；ELISA法检测脾细胞产生细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4水平，同时用RT-PCR技术检测IL-2、IFN-γ、IL-4 mRNA表达，以反映YPF-P对细胞因子分泌的及Th1、Th2细胞亚群功能的影响。