桑黄的液体发酵及其粗多糖抗肿瘤作用的研究

通过液体发酵培养，研究了不同培养基、不同培养条件对桑黄菌丝生长的影响，并利用Ig9（3）4正交试验筛选出了桑黄液体深层发酵的优化培养基。用直观分析法对正交试验结果进行了分析。从极差的大小可以看出，影响菌丝生长发育的因素主次依次是碳源、氮源、磷酸二氢钾、硫酸镁。结果表明：玉米粉为最佳碳源，麸皮为最佳氮源，优化培养基配方为：玉米粉5％、麸皮3％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸镁0.15％、VB120ug／100ml、VB230ug／100ml；最适菌丝体生长的发酵条件为：培养温度为26℃，摇瓶转速130r／min，pH值6.5，接种量15～20％，种子液培养时间为5天，装液量（500ml三角瓶）为140ml，发酵时间为7天。在此条件下，每100ml发酵液产菌丝体干重1.78g。 用水提、醇沉的方法分别提取了发酵上清液和菌丝体中的粗多糖，其粗多糖的得率分别为：每100ml发酵上清液得143.7mg粗多糖；每100g干菌丝体得3750mg粗多糖。用蒽酮法测粗多糖中多糖的含量为61％。 同时，对桑黄粗多糖的抗肿瘤作用进行了实验研究。利用小鼠Lewis肺癌细胞建立肺转移动物模型及小鼠S-180细胞建立局部转移动物模型，分别以12.5mg／（kg.d）、25mg／（kg.d）、50mg（／kg.d）、100mg／（kg.d）、200mg／（kg.d）进行口服给药。结果表明，桑黄粗多糖50mg／（kg.d）口服，连续两周，可使荷瘤鼠的肺转移结节数减少，肺湿重减轻，并且使荷瘤鼠的存活期明显延长（p<0.01）。但对实体瘤的作用较弱，接种肿瘤细胞后待肿瘤结节达到一定大小的荷瘤鼠口服桑黄粗多糖进行治疗，未能观察到明显的效果；试验结果还表明，桑黄粗多糖的抗肿瘤作用与其剂量有关，只有达到一定剂量才能达到治疗的目的。