咖啡碱和绿原酸对小鼠和3T3-L1细胞脂肪代谢的影响

目的：研究咖啡主要成分咖啡碱，绿原酸及其组合对小鼠和3T3-L1细胞的脂类代谢的影响。 方法：40只雌性昆明小鼠被随机分成4个小组：对照组，0.06%咖啡碱组，0.2%绿原酸组，0.06%咖啡碱+0.2%绿原酸组，每周测重，喂养12周。摘取并称各器官、腹腔内脂肪（IPAT）。分析血清生化指标，测定肝脏脂类含量、脂肪酸代谢酶活性、mRNA和蛋白的表达量。MTT法检测咖啡碱、绿原酸对3T3-L1细胞增殖的影响；3T3-L1细胞诱导分化12天测定细胞内TG含量；用Real Time qPCR分析诱导分化细胞中PPARγ2、C/EBPα、AMPK、ATGL、Glut4、ACO、CAT、HSL和GPDH的mRNA表达水平；用Western Blotting测定AMPK、ATGL、HSL和FAS的蛋白表达水平；测定FAS、HSL和GPDH的酶活性。 结果： （1）咖啡碱+绿原酸显著减少小鼠的体重增加和IPAT质量，而单独组没有明显变化。 （2）咖啡碱+绿原酸降低血中和肝脏中脂类的浓度。 （3）咖啡碱+绿原酸明显增加ACO、CAT的酶活性和mRNA表达水平，显著抑制FAS的酶活性和蛋白表达水平。 （4）咖啡碱+绿原酸能够显著地降低TG的合成，主要是绿原酸的作用。 （5）咖啡碱+绿原酸，在细胞分化第4天降低PPARγ2、C/EBPα mRNA的表达水平。 （6）咖啡碱+绿原酸，在细胞分化第12天，提高AMPK、ATGL、HSL的活性、mRNA和蛋白的表达水平；增强了Glut4、ACO、CAT mRNA的表达水平；抑制了GPDH活性和mRNA表达水平。 结论：咖啡碱+绿原酸通过降低血中生化指标和肝脏中脂类的浓度，减少小鼠的体重和IPAT质量，有较好降脂减肥作用。其作用机制是通过调节肝脏及脂肪细胞与脂类代谢相关酶的活性、基因和蛋白表达水平，抑制脂肪细胞分化核转录因子的mRNA表达水平，减少脂肪沉积。提示咖啡碱+绿原酸具有潜在预防肥胖的功能。