常用中药川黄柏和黄连化学成分及生物活性比较研究

常用中药川黄柏（Cortex Phellodendron Chinenseis）为芸香科植物黄皮树（Phellodendron Chinense Schneid）的干燥树皮。其具有多样的药理活性,如清热解毒、降血压、治疗消化道溃疡、抗病原微生物等。本课题组前期工作对黄连生物总碱部位进行过研究,发现其具有很好的降糖作用,原小檗碱类化合物为降糖作用的主要成分。川黄柏的主要成分也为原小檗碱类化合物,对黄连和川黄柏生物总碱部位进行了降血糖作用筛选,初步结果显示川黄柏比黄连具有更好的降血糖活性,由于近十年来对川黄柏化学成分的研究较少,因此对川黄柏化学成分进行深入的研究具有重要意义。 从川黄柏70%乙醇提取物中共分离得到40个化合物,鉴定了其中的39个化合物,分别为:盐酸小檗碱（1）,咖啡酸乙酯（2）,异香草醛（3）,阿魏酸（4）,（±）-5,5′-Dimethoxylariciresinol（5）,Methyl orsellinate（6）,γ-崖椒碱（7）,（±）-Lyoniresinol（8）,β-谷甾醇（9）,豆甾醇（10）,药根碱（11）,巴马汀（12）,非洲防己碱（13）,黄柏碱（14）,菜油甾醇（15）,对羟基苯甲酸（17）,对羟基苯乙醇（18）,1-甲氧基-2-羟基苯甲酸（19）,5-O-阿魏酰-奎尼酸（20）,3-O-阿魏酰奎尼酸（21）,4-O-阿魏酰奎尼酸（22）,3-O-阿魏酰奎尼酸甲酯（23）,5-O-阿魏酰奎尼酸甲酯（24）,7R,8S-4,7,9,9′-Trihydroxy-3,3′-dimethoxy-8-O-4′-neoligan（25）,7S,8R-4,7,9,9′-Tetrohydroxy-3,3′-dimethoxy-8-O-4′-neoligan（26）,3′,4-Di-O-methoxyl-cadrusin（27）,Syringin（28）,咖啡酸（29）,三乙胺（30）,肉桂酸（31）,2,4-二羟基-3,5二甲基苯甲酸（32）,阿魏酸丁酯（33）,表小檗碱（34）,醋酸小檗碱（35）,小檗亭（37）,Synapylaldehyde（38）,3,4,5-Trimethoxyphenyl-β-D-glucopyranoside（39）,Ethyl orsellinate（40）,3-O-阿魏酰-粘-奎尼酸（41）。其中20个化合物（2-4、6、17-19、22、25、26、27、29、30-32、35、37、39、40、41）为首次从该属植物中发现的化合物。由于对化合物35、25、27的结构解析很有代表性,对此三个化合物的结构解析进行了详细的论述,并对其进行了信号归属。 对黄连生物总碱部位进行分离,得到6个化合物,鉴定了其中的5个化合物。分别为:盐酸小檗碱（1）、药根碱（11）、巴马汀（12）、黄连碱（36）、四氢黄连碱（16）。 对黄连及黄柏的生物总碱部位进行了紫外、HPLC图谱和LC-MS~n比较。使用LC-MS~n方法鉴定了川黄柏中5个小檗碱类生物碱,分别为:小檗碱（1）、药根碱（11）、巴马汀（12）、小檗红碱（42）、Phellodendron A（43）。使用LC-MS~n方法鉴定了黄连中6个小檗碱类生物碱,分别为:黄连碱（36）、药根碱（11）、巴马汀（12）、表小檗碱（35）、小檗红碱（42）和盐酸小檗碱（1）。 对从川黄柏中分离得到的部分单体化合物进行了PTP1B酶的模型筛选,均未发现有明显活性。 此外,在川黄柏中分离得到一系列阿魏酰奎尼酸类化合物,该类化合物为奎尼酸与阿魏酸缩合而成的酚酸类天然产物。分离过程中发现该类化合物可以用氯化铵酸式缓冲盐来抑制羧基和酚羟基的游离,从而获得很好的分离效果。该类化合物在常温下测定,氢谱裂分不明显,碳谱高场区信号较矮,可能由于构象不稳定导致。通过升温至70℃后,氢谱裂分得到改善。同时对阿魏酸在奎尼酸不同位置连接时的氢谱裂分规律进行了总结,对此类化合物的结构解析具有指导意义。